應用LAMP檢測技術快速診斷大豆根莖部真菌病害.pdf

1、大豆是原產于我國的一年生的草本植物，現(xiàn)在世界各地都有栽培。大豆也是一種多病害植物，大豆根莖部病害是影響大豆產量和品質的重要因素之一，其分布廣泛、病原菌種類復雜，危害嚴重，較難防治。特別是感病初期，癥狀相似度極高，不易區(qū)分。傳統(tǒng)的診斷方法費力、耗時長，且容易造成誤診，不利于及時指導防治。所以急需要開發(fā)一些新技術對引起大豆根部病害的不同病原菌進行快速檢測。目前對植物病原菌的分子檢測需將田間采集的病害樣本帶回實驗室用PCR儀來完成，耗時長，難

2、以達到在田間現(xiàn)場對植物病害進行快速診斷的需求，不利于對病害進行指導及時防治。本試驗研發(fā)了一套簡便，快速，安全，且檢測成本低能在田間現(xiàn)場快速診斷病害的LAMP方法，為實行田間現(xiàn)場快速診斷病害提供了必要的技術支持。
　　1.應用本實驗室研發(fā)的分別針對尖鐮孢菌(Fusarium oxysporum)、茄腐鐮孢菌(Fusarium solani)、層出鐮孢菌(Fusarium proliferatum)、木賊鐮孢菌(Fusariumequ

3、iseti)、禾谷鐮孢菌(Fusarium graminearum)、立枯絲核菌（Rhizoctonia solani）和菜豆殼球孢菌(Macrophomina phaseolina)的7個LAMP檢測體系對從江蘇省、安徽省、湖北省和云南省采集的640份病害樣本進行快速病害診斷。LAMP檢測陽性率分別為:20％、27％、12％、7％、4％、10％和13％;安徽省和江蘇省復合侵染情況比較嚴重，占檢測陽性率31％，其中由兩種病原菌侵染的病害

4、樣本和由三種病原菌侵染的病害樣本分別為6％、24％，尖鐮孢菌和茄腐鐮孢菌為該地區(qū)的優(yōu)勢種，其次為層出鐮孢菌和木賦鐮孢菌。采用LAMP檢測技術在實驗室內完成病害診斷僅需1.5～2 h，與傳統(tǒng)診斷、普通分子技術診斷相比較，該技術簡便，快速，安全，檢測成本低。在農業(yè)生產上十分有利于對病害進行指導及時防治。
　　2.本試驗根據LAMP檢測技術在恒溫條件下進行反應這一特點，通過反復探索設計了一套簡易的，實用的用保溫杯來替代PCR儀提供恒溫（