ZAG通過P-AKT-GLUT4信號通路調節(jié)脂肪細胞胰島素抵抗的作用及機制.pdf

1、目的：
　　探究鋅α2糖蛋白(Zinc-alpha2-glycoprotein,ZAG)對胰島素抵抗3T3-L1脂肪細胞的作用及基于P-AKT/GLUT4信號通路探討其可能的機制。
　　方法：
　　3T3-L1脂肪細胞通過體外培養(yǎng)5代，誘導分化成為成熟細胞，用油紅O染色法觀察細胞內脂滴情況。隨機分別予以生理鹽水、地塞米松注射液干預48h，即為空白對照組（N組）、胰島素抵抗模型組（IR組），IR組加入ZAG干預24h即為

2、ZAG組。ELISA方法測定各組細胞培養(yǎng)液上清中腫瘤壞死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素6(Interleukin-6,IL-6)的含量；Western Blotting法測定各組細胞中脂聯(lián)素、瘦素、磷酸化絲氨/蘇氨酸激酶(Phosphorylated serine/threonine kinase,P-AKT)、葡萄糖轉運體4(glucose transporter4,GLUT4）蛋白表達水平

3、；RT-PCR方法測定脂聯(lián)素、瘦素、TNF-α、IL-6、AKT、GLUT4 mRNA表達水平。
　　結果：
　?。?）脂聯(lián)素、瘦素蛋白及mRNA表達水平：IR組比N組脂聯(lián)素降低（P<0.05）， IR組比N組瘦素增高（P<0.05）；與IR組相比，ZAG組脂聯(lián)素蛋白及mRNA表達增高（P<0.05），瘦素蛋白及mRNA表達降低（P<0.05）。
　?。?） TNF-α、IL-6細胞上清液含量及mRNA表達水平：IR組

4、比N組TNF-α、IL-6細胞上清液含量增高（P<0.05）；與IR組相比，ZAG組TNF-α、IL-6細胞上清液含量及mRNA表達降低（P<0.05）。
　?。?）P-AKT蛋白與AKT mRNA的表達水平：IR組比N組降低（P<0.05）；與IR組相比，ZAG組P-AKT蛋白及AKT mRNA表達增高（P<0.05）。
　　（4）GLUT4蛋白與mRNA的表達水平：IR組比N組降低（P<0.05）；與IR組相比，ZAG組

5、GLUT4蛋白及mRNA表達增高（P<0.05）。
　　結論：
　　ZAG增高3T3-L1脂肪細胞脂聯(lián)素蛋白及mRNA表達水平，降低瘦素、TNF-α、IL-6蛋白及mRNA表達水平，因此證實ZAG可以改善脂肪細胞胰島素抵抗，可能與其通過提高P-AKT/GLUT4信號通路中P-AKT水平進一步提高GLUT4表達水平有關。
　　本課題為自然科學基金“山西省基礎研究項目―鋅α2糖蛋白參與調節(jié)胰島素抵抗機制研究（編號：2013