傳統(tǒng)酸菜乳酸菌腸溶微膠囊顆粒的制備.pdf

1、乳酸菌是一種益生菌，對人體有許多重要生理功能，如調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，提高免疫力等。隨著生活節(jié)奏加快，有關(guān)益生菌制劑的研究和產(chǎn)品開發(fā)越來越受到人們的關(guān)注。目前國內(nèi)有關(guān)乳酸菌制劑的研究和產(chǎn)品多數(shù)以國外商品動物性益生菌為主，而且大多數(shù)為乳酸菌微膠囊或粉劑的研究。有關(guān)從國內(nèi)傳統(tǒng)酸菜或泡菜中分離純化植物乳桿菌為菌種，研究乳酸菌微膠囊腸溶顆粒的報道甚少。包括益生菌在內(nèi)各種生物都有地域性和適宜性，中國傳統(tǒng)食品中的乳酸菌更適合本土群眾。本論文根據(jù)目前我國

2、乳酸菌制劑領(lǐng)域存在的問題，從傳統(tǒng)酸菜和泡菜中分離植物乳桿菌為菌種，探索可制備乳酸菌腸溶微膠囊顆粒的工藝和制劑的相關(guān)特性。
　　研究內(nèi)容與結(jié)果如下：
　　1、乳酸菌的分離和鑒定
　　使用MRS分離培養(yǎng)基，從辣白菜和酸菜中分離出6株乳酸菌。經(jīng)過革蘭氏染色試驗、過氧化氫酶試驗、明膠液化試驗、吲哚試驗、硝酸鹽還原試驗和糖發(fā)酵試驗鑒定得到這6株乳酸菌均為植物乳桿菌。
　　2、乳酸菌的篩選
　?。?）產(chǎn)細(xì)菌素乳酸菌的篩

3、選：以金黃色葡萄球菌為指示菌進(jìn)行抑菌試驗，篩選出植物乳桿菌S-2菌株，使用游標(biāo)卡尺測得抑菌圈直徑為1.154cm。
　?。?）產(chǎn)γ-氨基丁酸(GABA)乳酸菌的篩選：分別運(yùn)用薄層層析法和分光光度法分別對上述6株菌產(chǎn) GABA的能力進(jìn)行定性和定量分析。實(shí)驗結(jié)果表明，此6株菌中S-2菌產(chǎn)GABA最多，產(chǎn)量為2.013mg/mL。
　　3、擴(kuò)大培養(yǎng)和離心分離菌體
　　將篩選得到的S-2菌株移至MRS液體培養(yǎng)基，在37℃、10

4、0r/min培養(yǎng)，測定生長曲線和pH變化曲線，探究了離心速度和離心時間對乳酸菌活菌數(shù)的影響，研究表明，在6000r/min，離心10min條件下所得植物乳桿菌菌泥活菌數(shù)多且存活率高，分別為7.93×1010 cfu/g、85.8％。
　　4、菌泥真空冷凍干燥與凍干保護(hù)劑
　　采用15%脫脂乳、4%海藻糖、1%維生素C、1.5%谷氨酸鈉作為凍干保護(hù)劑。在預(yù)凍溫度-27.3℃，預(yù)凍時間2.5h，凍干時間12.5h，真空度10Pa

5、條件下進(jìn)行真空冷凍干燥，考察了凍干曲線。凍干后，菌體存活率為78.9%，活菌數(shù)達(dá)2.25×1011 cfu/mL。
　　5、乳酸菌腸溶微膠囊的制備
　　使用成膜性能優(yōu)良的海藻酸鈉和具有腸溶性的羥丙甲纖維素鄰苯二甲酸酯（HPMCP）作為壁材，采用傳統(tǒng)包衣方法包埋植物乳桿菌，海藻酸鈉和HPMCP以不同濃度組合包埋，測定包埋率和存活率，實(shí)驗得出當(dāng)海藻酸鈉和 HPMCP的濃度都分別為1%的時候，植物乳桿菌的包埋率可達(dá)99.52%，存