雄激素經(jīng)IGF-I介導調(diào)節(jié)運動骨骼肌mTOR信號機理的探索.pdf

1、雄激素經(jīng)IGF-I介導調(diào)節(jié)運動骨骼肌mTOR信號機理的探索論文隨機驗證編號：BT6189921953IV 摘要 摘要 研究目的：本研究通過不同強度運動及應用 IGF-I 和雄激素，觀察運動骨骼肌 AR、MAPK 和 mTOR 通路間的變化特點與規(guī)律，對雄激素經(jīng) IGF-I 介導調(diào)節(jié)運動骨骼肌 mTOR 信號機理進行探討。 研究方法： 實驗一雄性 SD 大鼠進行不同強度運動 （跑臺運動： 速度 20min/min和 26m/min、60m

2、in、10%坡度） ，運動后即刻、6h 和 12h 取材白腓腸肌。實驗二雄性 SD 大鼠肌肉注射 IGF-I，注射后 20、60 和 120min 取白腓腸肌。實驗三將雄性 SD 大鼠分為安靜對照組 （S） 、 DHT 組 （D） 、 運動組 （E） 和 DHT 運動組 （ED） ，D 和 ED 組頸背部皮下埋植 DHT 緩釋劑，其余假手術(shù)。E 和 ED 組進行以 20m/min、60min、10%坡度的跑臺運動。再細分為三天組和十天組

3、，運動后 12h 取白腓腸肌。BCA 法測肌肉蛋白濃度，HE 染色觀察骨骼肌形態(tài)，實時熒光定量 RT-PCR 測肌肉 AR 和 IGF-I 基因表達， Western Blot 法測肌肉 MHC 和 AR、 MEK、 ERK、 p90RSK、mTOR、p70S6K 和 4EBP1 的磷酸化。 研究結(jié)果： （1）急性運動時，骨骼肌 AR、MAPK 和 mTOR 通路磷酸化狀態(tài)存在運動強度依賴性，且 MAPK 通路活性在運動后即刻出現(xiàn)峰值

4、，AR 和 mTOR 通路的出現(xiàn)于 6 小時。 （2）肌肉注射外源性 IGF-I 增強了肌肉 AR 表達，AR 活性于注射后 60min 達峰值。骨骼肌 MAPK 和 mTOR 通路活性增強，均于注射后 20min 達到峰值。 （3）皮下埋植 DHT 使肌肉橫斷面、濕重和 MHC 明顯增加。運動加強了雄激素的促合成效應。 （4）DHT 作用三天明顯增加肌肉內(nèi) IGF-I 含量，而 DHT 結(jié)合運動后能進一步提高肌肉內(nèi) IGF-I。 （5

5、）皮下埋植 DHT 使 MAPK 和 mTOR 通路的表達均顯著增強。 研究結(jié)論： （1）骨骼肌 AR、MAPK 通路和 mTOR 通路的活性存在強度依賴性。急性運動后骨骼肌 MAPK 通路峰值出現(xiàn)較早，AR 和 mTOR 通路峰值較晚。 （2）雄激素明顯促進了骨骼肌的肥大，還增強了肌肉 IGF-I 生成。運動能加強了雄激素的促肌肉合成效應。同時，IGF-I 除促進骨骼肌 AR 的表達及其活性外，還能迅速促進 MAPK 通路和 mTOR

6、 通路的活性。 （3）骨骼肌 MAPK 通路和 mTOR 通路均為雄激素的非基因途徑，且 MAPK 通路位于 mTOR 通路的上游。 關(guān)鍵詞：雄激素；AR；mTOR 通路；MAPK 通路；適應性肌肉肥大 雄激素經(jīng)IGF-I介導調(diào)節(jié)運動骨骼肌mTOR信號機理的探索論文隨機驗證編號：BT6189921953VI DHT-containing pellet. Exercise had synergetic enhancement effect

7、 on exogenous androgen on skeletal muscle. 4) The content of musclar IGF-I was significantly increased by DHT in three days which had synergetic enhancement effect on musclar IGF-I combination of exercise. 5) The phosp

8、horylated of MAPK pathway and mTOR pathway were significantly increased by DHT. Conclusions: 1) The increase on bioactivity of AR, MAPK pathway and mTOR pathway had intensity-dependent manner to exercise. The pe

9、ak of MAPK pathway occured more early than the AR and mTOR pathway's. 2) Androgen promoted muscular hypertrophy, so as the biosynthesis of musclar IGF-I. Exercise had synergistic effect of DHT on these effects.

10、 The bioactivity of AR, MAPK pathway and mTOR pathway could enhanced by IGF-I. 3) MAPK pathway was one of upstreams signaling of mTOR pathway during nongenomic androgen actions of skeletal muscle. Key words: androge