一種微孔板生物毒性快速檢測(cè)技術(shù)的建立.pdf

1、本研究建立了一種利用多種微生物急性毒性快速檢測(cè)技術(shù)TOXPlate，其主要原理是將受試微生物暴露于一系列梯度濃度的樣品，應(yīng)用2,3,5-氯化三苯基四氮唑鹽(triphenyl tetrazolium chloride，TTC)作為指示劑檢細(xì)胞在毒物脅迫下的生長(zhǎng)抑制效應(yīng)，生長(zhǎng)抑制程度由細(xì)胞還原TTC的量所決定。
　　以環(huán)境工程菌種庫(kù)中的菌種資源為基礎(chǔ)，測(cè)試各菌株對(duì)若干種化學(xué)物質(zhì)的反應(yīng)，并根據(jù)反應(yīng)的靈敏度、與TTC作用的穩(wěn)定性、受試生

2、物種類(lèi)的多樣性等原則，篩選出11株受試微生物作為受試生物，其中10株屬于原核生物，1株為真核生物（酵母），它們分別是:Comamonas testosterone, Brevibacterium epidermidis,Staphylococcus sciuri,iaphorobacter nitroreducens,Brevundimonas diminuta,Pseudomonas Sp., Ochrobactrumanthropi

3、, Citrobacter freundii,Pantoeaagglomerans,Enterococcus casseliflavus,Saccharomyces cerevisiae。
　　對(duì)試驗(yàn)的TTC濃度和接種生物量進(jìn)行了優(yōu)化。不同濃度TTC對(duì)微生物的作用的研究表明，受試生物不同，對(duì)TTC的敏感程度也不同，受試菌株在TTC濃度為0.005％-0.01％之間時(shí)與TTC反應(yīng)較好，最終確定TOXPlate試驗(yàn)TTC濃度為0.01