牛皮杜鵑組織培養(yǎng)及生物多樣性分析.pdf

1、牛皮杜鵑是一種極具觀賞性的高山杜鵑，主要靠種子繁殖。由于種子的自然發(fā)芽率低、繁殖速度緩慢，加之人們對其生長環(huán)境的嚴(yán)重破壞，使得牛皮杜鵑已經(jīng)到了達(dá)瀕危物種的程度。本研究利用組織培養(yǎng)的方法對其進(jìn)行離體培養(yǎng)，可以使瀕危的牛皮杜鵑得到延續(xù)和發(fā)展，有著十分重要的意義。另外，本研究還從解剖學(xué)和分子水平上分析了海拔高度對細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)方面和遺傳多樣性方面的影響，為進(jìn)一步保護(hù)和開發(fā)牛皮杜鵑提供理論依據(jù)。
　　通過對牛皮杜鵑組織培養(yǎng)的研究得出：最佳

2、誘導(dǎo)培養(yǎng)基為 WPM+8 mg/L ZT+3 mg/L IBA，pH=5.2，附加白糖20g/L；最佳生根壯苗培養(yǎng)基為WPM+0.4 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA+1g/L AC；最佳移栽基質(zhì)為苔蘚土，移栽成活率達(dá)94％。
　　通過對牛皮杜鵑葉片解剖結(jié)果上的研究，結(jié)果表明：利用光學(xué)顯微鏡對長白山海拔2570 m、2381 m、1982 m、1788 m和敦化老白山1695 m不同高度生長的牛皮杜鵑葉片橫切面的觀察。觀

3、察結(jié)果為隨著海拔高度的增加葉片外部形態(tài)有逐漸減小的趨勢，葉片內(nèi)部結(jié)構(gòu)中葉片主脈直徑、柵欄組織厚度、上表皮厚度等有逐漸增加的趨勢。
　　通過RAPD技術(shù)對牛皮杜鵑多樣性的初步研究表明：適合牛皮杜鵑的RAPD反應(yīng)優(yōu)化體系為：20μL PCR反應(yīng)總體積中含模板DNA10 ng，Mg2+1.5 mmol/L，引物15 pmol/μL，dNTP0.15 mmol/L，Taq DNA聚合酶1.0 U。另外，對5個(gè)不同海拔的群體進(jìn)行了遺傳多樣性