馬纓杜鵑種子萌發(fā)與組織培養(yǎng)技術(shù)體系研究.pdf

1、本研究以馬纓杜鵑(Rhododendron delavayi Franch)為試驗(yàn)材料，從種子萌發(fā)和組織培養(yǎng)兩方面探索馬纓杜鵑繁殖的有效途徑。種子萌發(fā)采用不同浸種方式和貯藏條件對種子發(fā)芽率的影響，從而篩選出適宜馬纓杜鵑種子的浸種方式和貯藏條件；組織培養(yǎng)以馬纓杜鵑莖尖、莖段及無菌苗的莖尖、莖段、葉片、根為外植體，著重研究培養(yǎng)需要的最適培養(yǎng)基類型和培養(yǎng)程序，以及培養(yǎng)過程中防止污染和減輕褐變的措施，建立起馬纓杜鵑組織培養(yǎng)和快速繁殖技術(shù)體系。馬

2、纓杜鵑種子萌發(fā)及組織培養(yǎng)體系各環(huán)節(jié)的研究結(jié)果如下：
　　 (1)0.5％硼酸溶液、室溫蒸餾水、30℃蒸餾水浸種24h均能提高馬纓杜鵑種子發(fā)芽率，但以0.5％硼酸溶液浸種效果最好，種子發(fā)芽率和發(fā)芽勢分別為71.08％和22.9％，同時(shí)，在相同浸種處理下，以馬雄山居群的種子發(fā)芽率和發(fā)芽勢最高；對馬纓杜鵑種子進(jìn)行短期貯藏時(shí)，室溫貯藏條件是較適合的方法，長期貯藏時(shí)，冷藏貯藏條件是較適合的方法。
　　 (2)種子無菌發(fā)芽的最適培養(yǎng)

3、基為：1/4MS+KT1.0mg/L+水解酪蛋白300mg/L，其中蔗糖25g/L，卡拉膠5g/L，45天后發(fā)芽率為73.33％。
　　 (3)細(xì)胞分裂素的篩選：1.0mg/L的6-BA和KT能促進(jìn)外植體的頂芽伸長和腋芽萌發(fā)，但未見增殖，而且在試驗(yàn)中未發(fā)現(xiàn)6-BA對馬纓杜鵑有毒害作用；0.2mg/L的TDZ雖然不能促進(jìn)馬纓杜鵑莖段腋芽的萌發(fā)，但能夠使其它外植體直接誘導(dǎo)出叢生芽和形成較多愈傷組織。
　　 (4)外植體選?。?/p>

4、以幼嫩無菌苗為接種材料時(shí)，帶芽莖段作為外植體的成活率和增殖率高；而以野生馬纓杜鵑植株為外植體時(shí)，枝條中部及下部腋芽作為外植體，對減輕污染有較好的效果，外植體采集最佳時(shí)間為3月下旬至4月上旬，切取莖尖時(shí)，較大的組織效果較好。
　　 (5)外植體消毒：馬纓杜鵑種子萌發(fā)的小苗，采用0.1％升汞十吐溫2～3滴溶液消毒15min；野生馬纓杜鵑莖尖，先用70％酒精表面消毒20s，再用0.1％升汞十吐溫2～3滴溶液深層消毒10min；野生馬纓

5、杜鵑莖段，先用70％酒精表面消毒30s，再用0.1％升汞十吐溫2～3滴溶液深層消毒15min。
　　 (6)繼代增殖：WPM+TDZ0.8mg/L+IBA0.2mg/L+KT0.0mg/L為誘導(dǎo)叢生芽增殖的最佳培養(yǎng)基配比，60天時(shí)叢生芽平均增殖倍數(shù)可達(dá)6.22。
　　 (7)適合無菌苗莖尖及莖段叢生芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基配方組合為：WPM+TDZ0.8mg/L+IBA0.2mg/L+KT0.0mg/L，60天時(shí)叢生芽平均增殖倍數(shù)

6、可達(dá)6.51。
　　 (8)適合無菌苗葉片愈傷組織誘導(dǎo)的培養(yǎng)基配方組合為：WPM+TDZ0.1mg/L+IBA0.2mg/L+NAA0.2mg/L，60天后，誘導(dǎo)率為62.22％；適合誘導(dǎo)無菌苗葉片愈傷組織出芽的培養(yǎng)基配方組合為：WPM+TDZ0.2mg/L+IBA0.4mg/L+NAA0.0mg/L，60天后，出芽率為70.59％，平均芽個(gè)數(shù)為7.25個(gè)。
　　 (9)適合叢生芽伸長培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方組合為：WPM+KT

7、0.5mg/L+GA32.0mg/L+AC0.1％，45天后，芽平均生長量為3.3cm。
　　 (10)適合叢生芽芽苗壯苗培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方組合為：WPM培養(yǎng)基。
　　 (11)適合馬纓杜鵑組織培養(yǎng)苗生根的培養(yǎng)基配方組合為：1/2WPM+NAA0.5mg/L+IBA2.0mg/L+AC0.2％+蔗糖10g/L，90天后，生根率為100％，平均根數(shù)為16.6條，平均根長為2.92cm。
　　 (12)煉苗移栽基質(zhì)以腐