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文檔簡介
1、目的:探討腺病毒介導GPX基因轉染對香煙煙霧提取物(CSE)致血管內皮細胞氧化損傷和凋亡的影響。 方法:體外培養(yǎng)人臍靜脈內皮細胞株(ECV304),取對數(shù)生長期細胞用于實驗。予0、30、50、70感染倍數(shù)(MOI)的腺病毒連接LacZ(Ad-LacZ)轉染ECV304,觀察其轉染率。予0%、5%、10%CSE干預ECV304 24h及10%CSE干預0、6、12、24h,分別觀察其凋亡指數(shù)(AI)。將ECV304分為四組培養(yǎng),分
2、別予0%CSE(空白組)、10%CSE(CSE組)、LacZ+10%CSE(LacZ組)、GPX轉染+10%CSE(GPX組)干預。收集各組干預24h后細胞爬片及上清液,硫代戊巴比妥酸法測上清液MDA濃度,黃嘌呤氧化酶法測SOD活力,TUNEL法檢測細胞AI。 結果: 1.70MOI的Ad-LacZ轉染率高達(93.3±2.9)%。 2.10%CSE干預ECV304 24h后,其AI高于0%及5%CSE干預組,差
3、異有統(tǒng)計學意義(p均<0.05)。10%CSE干預ECV304 24h后,其AI高于0h、6h和12h組,差異有統(tǒng)計學意義(p均<0.05)。 3.10%CSE干預ECV304 24h后,與空白組比較,其上清液中MDA濃度增加,SOD活力降低,且AI增加,差異有統(tǒng)計學意義(p均<0.05)。 4.腺病毒介導的GPX基因轉染后的ECV304,經(jīng)10%CSE干預24h后,與CSE組及LacZ組比較,其上清液中MDA濃度降低,
4、SOD活力增加,AI降低,差異有統(tǒng)計學意義(p均<0.05)。 5.所有四組細胞培養(yǎng)上清液中MDA濃度與AI呈正相關(r=0.913,p<0.05),SOD活力與AI呈負相關(r=0.660,p<0.05)。 結論: 1.CSE能導致內皮細胞氧化/抗氧化失衡及凋亡,其致凋亡作用呈時間及濃度依賴性。 2.腺病毒介導GPX基因轉染可以部分抑制CSE致內皮細胞氧化/抗氧化失衡及凋亡作用。 3.ECV30
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