水稻HL-CMS育性恢復(fù)基因Rf6的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、水稻紅蓮型細(xì)胞質(zhì)雄性不育(HL-CMS)的育性恢復(fù)受Rf5和Rf6共同控制。Rf5定位于第10號染色體，編碼的蛋白RF5能與GRP162形成復(fù)合物，識別并催化atp6-orfH79轉(zhuǎn)錄本剪切。但Rf6定位于水稻8號染色體上，功能不十分清楚，本研究對Rf6的研究，取得了如下結(jié)果：
　　1、根據(jù)Rf6定位信息，克隆了預(yù)測的具有PPR結(jié)構(gòu)域的Rf6及rf6基因。根據(jù)Rf6和rf6序列差異性開發(fā)了區(qū)分兩個基因的分子標(biāo)記。含Rf6基因的材料

2、能擴(kuò)增出750 bp左右的特異條帶，而含有rf6基因的材料可擴(kuò)增出400 bp左右的特異條帶，這一分子標(biāo)記可用于恢復(fù)系的輔助選擇。
　　2、構(gòu)建了Rf6的植物超表達(dá)載體，通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化YTB和YTA，通過PCR鑒定，分別獲得了Rf6轉(zhuǎn)YTB的陽性植株11株和轉(zhuǎn)YTA陽性植株5株。
　　3、構(gòu)建了Rf6開放閱讀框的原核表達(dá)載體，轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21(DE3)中。20℃，0.3 mmol/L IPTG誘導(dǎo)4 h條件下，

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