小麥K型不育系育性恢復(fù)基因的cDNA-AFLP分析.pdf

1、利用雜種優(yōu)勢(shì)是進(jìn)一步發(fā)掘小麥產(chǎn)量的遺傳潛力以突破小麥單產(chǎn)瓶頸的重要途徑之一。小麥K型不育系具有細(xì)胞質(zhì)副效應(yīng)小、保持系和恢復(fù)系資源廣泛等特點(diǎn)，是極具有應(yīng)用前景的核質(zhì)互作雄性不育類型。但目前存在育性恢復(fù)度不高且不穩(wěn)定的缺陷，這也直接制約了K型不育在生產(chǎn)上的利用。本研究采用cDNA-AFLP技術(shù)，對(duì)小麥K型不育系豫麥3號(hào)及其相應(yīng)的保持系，以及兩個(gè)利用恢復(fù)系豫麥2號(hào)構(gòu)建的不育系豫麥3號(hào)遺傳背景的2BL染色體上恢復(fù)基因近等基因系在小麥二核花粉時(shí)期

2、的基因表達(dá)差異進(jìn)行分析，探討了育性恢復(fù)在細(xì)胞信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)、傳遞、基因轉(zhuǎn)錄與調(diào)控的分子機(jī)制，得到以下主要研究結(jié)果:
　　1.采用優(yōu)化的cDNA-AFLP體系，對(duì)小麥K型不育系豫麥3號(hào)及其相應(yīng)的保持系以及兩個(gè)恢復(fù)基因近等基因系BC9F2在小麥二核花粉時(shí)期的基因表達(dá)譜進(jìn)行了分析。通過120對(duì)引物擴(kuò)增，產(chǎn)生10757個(gè)轉(zhuǎn)錄本，其中26對(duì)引物檢測(cè)到了53個(gè)(4.9％)差異TDFs。經(jīng)大規(guī)?？寺　y(cè)序分析，最終獲得35個(gè)差異TDFs，并對(duì)這些差

3、異TDFs進(jìn)行了電子延伸。經(jīng)Blastx比對(duì)和功能分類分析，其中23條TDFs與NCBI有序列相似性，功能主要涉及細(xì)胞和組織代謝(37.1％)、轉(zhuǎn)錄因子(8.6％)、脅迫響應(yīng)(5.7％)、轉(zhuǎn)錄促進(jìn)(5.7％)、表達(dá)調(diào)節(jié)(5.7％)以及混合功能(29％)等;3條TDFs(8.6％)與未知功能蛋白相似性較高;其余9條TDFs(25.7％)未找到相似性匹配，可能是一些新基因。
　　2.35個(gè)差異TDFs涉及眾多方面的功能，這不僅表明了c