基因多態(tài)對氯乙烯接觸工人染色體損傷的修飾.pdf

1、氯乙烯單體(vinyl chloride monomer.VCM)是一種重要的化工原料,約95％用于合成聚氯乙烯。我國目前年產(chǎn)量約占全球產(chǎn)量的1/10,已成為世界聚氯乙烯生產(chǎn)大國。因此,龐大的職業(yè)接觸氯乙烯人群的健康問題值得關(guān)注。
　　 VCM是確定的人類致癌劑,可導(dǎo)致多系統(tǒng)、多器官腫瘤的發(fā)生。對其致癌機(jī)制的研究認(rèn)為主要是VCM活性代謝產(chǎn)物導(dǎo)致遺傳物質(zhì)損傷而啟動(dòng)致癌過程。
　　 目前,發(fā)達(dá)國家VCM職業(yè)接觸限值多為1pp

2、m(2.79mg/m3,PEL),而我國VCM時(shí)間加權(quán)平均容許濃度(PC-TWA)為10mg/m3,短時(shí)間接觸容許濃度為(PC-STEL)25mg/m3,高于西方國家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)數(shù)倍。在我國現(xiàn)行衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)接觸濃度情況下,能否對接觸工人產(chǎn)生健康損害特別是遺傳損傷十分必要進(jìn)行探討。毒物引起的遺傳損傷與個(gè)體易感性有關(guān),特別是其代謝活化差異和DNA修復(fù)能力不同相關(guān),該方面的研究有助于闡明其毒作用機(jī)制和進(jìn)行健康風(fēng)險(xiǎn)評估。
　　 本研究通過健康體

3、檢和遺傳損傷檢測評價(jià)VCM接觸工人健康狀況,并通過VCM工人累積接觸劑量的估算評價(jià)VCM暴露和遺傳損傷之間的關(guān)系,研究氯乙烯致遺傳損傷的劑量.反應(yīng)關(guān)系,為VCM職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的修訂提供參考和依據(jù)。通過人群代謝酶基因和DNA修復(fù)基因多態(tài)性及其與VCM致遺傳物質(zhì)損傷的關(guān)系研究,尋找VCM遺傳損傷的易感性生物標(biāo)志物,為闡明其毒作用機(jī)制和進(jìn)行健康風(fēng)險(xiǎn)評估提供科學(xué)依據(jù)。
　　 本次研究對VCM接觸工人進(jìn)行常規(guī)體檢和胞質(zhì)分裂阻滯微核實(shí)驗(yàn)調(diào)查其

4、健康狀況。微核檢測結(jié)果表明VCM接觸組損傷情況高于對照組,VCM暴露與微核率之間存在劑量反應(yīng)關(guān)系,即隨著VCM暴露量的增加微核率升高,同時(shí)發(fā)現(xiàn)高齡和女性為微核率升高的危險(xiǎn)因素。本研究提示外周血淋巴細(xì)胞微核率作為評價(jià)低濃度VCM暴露的效應(yīng)指標(biāo)具備一定的推廣應(yīng)用價(jià)值。健康體檢結(jié)果未發(fā)現(xiàn)接觸工人肝功能和肝B超等指標(biāo)高于對照組人群。
　　 采用BMD法對氯乙烯暴露總量與微核損傷關(guān)系進(jìn)行研究,分析表明男性和女性氯乙烯暴露總劑量BMDL分別

5、為3.35和2.43g,表明在總暴露劑量達(dá)到BMDL值時(shí)將引起微核損傷。該結(jié)果為我國VCM職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)修訂提供了參考價(jià)值。
　　 應(yīng)用PCR和RFLP技術(shù)對VCM接觸工人的代謝酶基因和DNA修復(fù)基因多態(tài)性進(jìn)行檢測,包括氯乙烯代謝相關(guān)的酶類ADH2、ALDH2、GSTT1、GSTM1、GSTP1、CYP2E1和CYP2D6等基因,DNA修復(fù)類基因OGG1、MGMT、XRCC1和P53等11個(gè)基因共18個(gè)多態(tài),并應(yīng)用PHASE2.0

6、.2軟件分析分析XRCC1和P53基因多態(tài)的雙體型。應(yīng)用Poisson回歸分析多態(tài)及相關(guān)因素對微核率的影響。
　　 多態(tài)檢測方法研究中采用CRS-PCR-RFLP方法建立了MGMT基因84位點(diǎn)多態(tài)檢測方法,該方法較傳統(tǒng)PCR-RFLP方法降低了實(shí)驗(yàn)費(fèi)用;而根據(jù)同一原理建立的MGMT基因143、160與178位點(diǎn)的檢測方法,進(jìn)行一次PCR聯(lián)合三次酶切即可檢測三個(gè)位點(diǎn)多態(tài),該方法可以減少標(biāo)本用量、實(shí)驗(yàn)耗材和時(shí)間;根據(jù)多重PCR和PC

7、R-RFLP原理建立的XRCC1基因194和399位點(diǎn)的檢測方法,亦達(dá)到了相似的效果。
　　 多因素Poisson逐步回歸分析微核危險(xiǎn)因素表明對照組年齡、ADH2、OGG1和MGMT84為影響因素,而接觸組中年齡、性別、ADH2、GSTT1、GSTP1、CYP2E1和MGMT84為影響因素,其他多態(tài)以及吸煙和飲酒等與微核無關(guān),未發(fā)現(xiàn)各危險(xiǎn)因素之間存在交互作用。
　　 研究表明對照人群ADH2G等位基因可視為保護(hù)因素,每增

8、加一個(gè)等位基因相應(yīng)危險(xiǎn)度為原來的0.61(0.39-0.94)。而接觸組結(jié)果顯示G等位基因?yàn)槲ｋU(xiǎn)因素,其FR為1.10(0.99-1.23)?？赡芘c氯乙烯接觸而誘導(dǎo)酶活性有關(guān),其機(jī)制有待研究。而ALDH2多態(tài)性在本次研究中未發(fā)現(xiàn)與微核變化有關(guān)。研究表明接觸組微核率隨著CYP2E1突變型等位基因C的增加而升高,其FR為1.75(1.28-2.33)。研究還發(fā)現(xiàn)接觸組中GSTT1缺失型為保護(hù)因素,而GSTP1G等位基因?yàn)槲ｋU(xiǎn)因素。
　

9、　 對于DNA修復(fù)相關(guān)基因研究表明,對照組中OGG1(GC+GG)個(gè)體相比CC基因型危險(xiǎn)度為3.07(1.44-7.96),而接觸組中卻未發(fā)現(xiàn)該現(xiàn)象,有待進(jìn)一步研究。對照組中MGMT84CT個(gè)體相對CC個(gè)體危險(xiǎn)度為0.53(0.25-0.98),而接觸組MGMT84CT個(gè)體相對CC個(gè)體危險(xiǎn)度為0.85(0.71-1.02),表明MGMT84位點(diǎn)T等位基因?yàn)楸Ｗo(hù)因素。分析XRCCl194、280、399位點(diǎn)和P53內(nèi)含子3、外顯子4及內(nèi)

10、含子6位點(diǎn)雙體型與微核的關(guān)系,結(jié)果表明XRCC1三位點(diǎn)雙體型與微核無關(guān),而對照組P53AAA/ABA與AAA/AAA相比,微核率較低(P=0.086)。
　　 結(jié)果表明微核有隨年齡增高的趨勢,且40歲以上年齡組微核率升高明顯,且與是否存在VCM暴露無關(guān)。而女性在VCM接觸組中表現(xiàn)為易感者,對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 總之,本研究說明在我國現(xiàn)行職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)下,VCM可引起遺傳損傷,當(dāng)前職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)有進(jìn)一步修訂的必要。V