河南棗主栽品種及灰棗群體遺傳變異分析.pdf

1、棗(ziziphus jujuba)原產(chǎn)我國，栽培歷史悠久，至今有文獻記載的已有三千年之久。我省為棗樹最早的栽培中心之一，至今栽培有兩千年以上的品種有灰棗、扁核酸、廣洋棗等。在長期的栽培過程中產(chǎn)生了豐富的遺傳變異，如何更為有效的利用這些寶貴的種質資源，將對我省棗業(yè)的發(fā)展有著至關重要的作用。本文利用ISSR標記技術輔以形態(tài)指標的調查，對我省主栽品種及灰棗群體的遺傳多樣性、遺傳學結構及遺傳學關系進行了研究，為我省棗品種選育、種質資源保護提供

2、理論依據(jù)。主要結果如下： 1.棗成熟葉片DNA提取方法，本試驗建立的改良CTAB法，是棗成熟葉片DNA提取的理想方法，該方法主要步驟是破碎細胞去除雜質、裂核釋放DNA和DNA沉淀分離，用該法提取的棗DNA能滿足限制性酶切、PCR擴增等試驗手段的要求。 2.棗ISSR反應體系的建立及引物的篩選，15μl反應體積中，模板DNA30ng，引物濃度O.8μmol/L, 2×Taq PCR MasterMix 7.5μl，用無菌雙

3、蒸水補足15μl。在PTC-200基因擴增儀上進行擴增，擴增程序：94℃預變性5min， 94℃變性30s，59℃(視引物而定)復性45s，72℃延伸75s，4D個循環(huán)；72℃延伸10 min；4℃保存.本試驗篩選出10條多態(tài)性好的引物用于灰棗群體及其它八個品種間的擴增。 3.共利用10條引物，對河南省棗主栽品種及灰棗群體進行了ISSR分析，共擴增出96個位點，平均每條引物9.6個位點，其中多態(tài)性位點87個，占總位點數(shù)的90.6

4、2％。 4.河南省棗主栽品種及灰棗群體的遺傳多樣性分析：河南省棗主栽品種群體的多態(tài)位點百分率為85.42％，平均遺傳距離為0.3951，檢測到的等位基因數(shù)na=1.8542，有效等位基因數(shù)ne=1.4525，基因多樣性h=0.2720，Shannon信息指數(shù)I=0.4152;灰棗群體的葉長、葉寬、葉形指數(shù)的標準差及變異系數(shù)分別為：0.89，0.50，0.30和18.24，21.01，14.42：灰棗群體的多態(tài)位點百分率79.1.

5、7％，平均遺傳距離為0.2866，檢查到的等位基因數(shù)na=1.7917，有效等位基因數(shù)ne＝1.2941，基因多樣性h.0.1843，Shannon信息指數(shù)I=0.2903。 5.河南省棗主栽品種與灰棗群體的總群體基因多樣度Ht=0.3124，群體內的基因多樣度Hs=0.2281，兩群體間基因多樣度Dsr0.0S4，基因分化系數(shù)Gst=0.2698，(見表10)說明群體間分化程度較高，即26.98％的變異存在于2個供試群體之間，

6、Nm=0.6766，說明群體間基因交流較少；灰棗總群體基因多樣度Ht為0.1874，群體內基因多樣度Hs為0.1763，群體間基因多樣度Dsr為0.0111，基因分化系數(shù)Gst為0.0593，即5.93％的變異存在與3個供試群體之間，基因流Nm為3.9662>1，說明群體間分化較小，基因流可防止由遺傳漂變引起的群體間的遺傳分化。 6.河南省棗主栽品種群體及灰棗群體間的遺傳一致度為0.7829，遺傳距離為0.2448。以遺傳相似系