表皮生長因子聯合促肝細胞生長因子體內誘導動員后自體骨髓干細胞治療大鼠糖尿病的實驗研究.pdf

1、目的:
　　 聯合應用表皮生長因子與促肝細胞生長因子體內誘導動員后的自體骨髓干細胞，探討能否使其轉分化為胰島素分泌細胞，觀察該方法對STZ大鼠糖尿病的治療作用。
　　 方法:
　　 一、分組及造模40只SD大鼠隨機分為對照組、糖尿病組、動員組及誘導組，每組10只，后3組均用鏈脲佐菌素(STZ)制做糖尿病大鼠模型，腹腔注射2％STZ溶液(55mg/Kg)，對照組腹腔注射等容積檸檬酸緩沖液。注射后3、7d后取尾靜脈血

2、測定隨機血糖，血糖＞16.7mmol/L為STZ糖尿病大鼠。
　　 二、動員及誘導成模后動員組和誘導組皮下注射重組人粒細胞集落刺激因子10μg/kg·d，連續(xù)15天，對照組和糖尿病組同樣注射等容積生理鹽水。誘導組于動員第二日腹腔注射表皮生長因子1ug/kg·d、促肝細胞生長因子0.3mg/kg·d，連續(xù)14天；其他3組腹腔注射等容積生理鹽水對照。實驗前各組大鼠測血糖、空腹血清胰島素值(ELISA法)、體重，實驗開始后每周測一次體

3、重，測一次血糖。4周后結束實驗，測定空腹血清胰島素值。處死大鼠，開腹腔取胰腺、肝和脾，用于免疫組織化學染色（SABC法，小鼠抗大鼠胰島素抗體），經MetaMorph/EvolutionMP5.0/BX51圖像采集分析系統(tǒng)對大鼠組織中胰島素陽性細胞進行分析。
　　 結果:
　　 一、生化檢測結果治療前，糖尿病組、動員組及誘導組大鼠血糖、血清胰島素無顯著性差異。治療后1周、2周、3周、4周時，誘導組大鼠血糖低于糖尿病組及動員

4、組(P＜0.05)，高于對照組(P＜0.05)，糖尿病組及動員組之間無明顯差異(P＞0.05)；治療后1周、2周、3周、4周時，誘導組大鼠血清胰島素高于糖尿病組及動員組(P＜0.05)，低于對照組(P＜0.05)，糖尿病組及動員組之間無明顯差異(P＞0.05)；整個實驗中對照組大鼠體重始終高于其它各組(P＜0.05)，其他各組間體重無明顯差異(P＞0.05)。
　　 二、免疫組織化學及圖像分析結果實驗終止時免疫組織化學法檢測各組

5、大鼠胰腺中胰島素陽性細胞百分比，對照組明顯高于其他各組(P＜0.01)，誘導組低于對照組但是明顯高于糖尿病組(P＜0.01)、動員組(P＜0.01)，而動員組與糖尿病組無顯著性差異(P＞0.05)。在誘導組的肝臟和脾臟中發(fā)現少量胰島素染色陽性細胞表達，其他各組肝臟和脾臟中均未發(fā)現胰島素染色陽性細胞表達。
　　 結論:
　　 1、表皮生長因子聯合促肝細胞生長因子體內可誘導動員后自體骨髓干細胞轉分化為胰島素分泌細胞.