中藥對(duì)動(dòng)物噪音應(yīng)激誘導(dǎo)流產(chǎn)的安胎作用及機(jī)理.pdf

1、本試驗(yàn)旨在研究自擬中藥對(duì)小鼠噪音應(yīng)激誘導(dǎo)流產(chǎn)的安胎作用及機(jī)理保護(hù)作用。本文通過兩部分試驗(yàn)來(lái)探討中藥對(duì)小鼠噪音應(yīng)激誘導(dǎo)流產(chǎn)的安胎作用及機(jī)理。
　　 一、噪音誘導(dǎo)小鼠流產(chǎn)模型的建立。將妊娠小鼠隨機(jī)分為6組。A組小鼠常規(guī)飼養(yǎng),為空白對(duì)照組;B,C,D,E和F組小鼠于孕3d開始,每天每組分別用120分貝(Decibel,dB)、100dB、80dB、60dB和40dB的噪音刺激5h,連續(xù)7d。各組試驗(yàn)鼠于孕第10d剖殺,記錄胚胎發(fā)育情況

2、、胚胎著床數(shù)和死胚數(shù),計(jì)算試驗(yàn)各組的流產(chǎn)率、胚胎吸收率。結(jié)果表明,各組小鼠因噪音應(yīng)激均可引起流產(chǎn)。A組,流產(chǎn)率為0.0％,胚胎吸收比率5.49%;B組,120dB導(dǎo)致絕大多數(shù)妊娠小鼠流產(chǎn),妊娠剖檢,子宮內(nèi)無(wú)胎兒,無(wú)法計(jì)算死胎數(shù);C組,小鼠胚胎吸收率為92.77%,妊娠第10d剖檢可見100%的妊娠小鼠流產(chǎn)。D組、E組和F組流產(chǎn)率分別是50%、20%和10.0%,胚胎吸收比率分別是44.83%、8.89%和6.52%。因此小鼠從孕3d到第

3、8d,每天用100dB噪音刺激5h,第10d剖檢,確定為噪音誘導(dǎo)小鼠流產(chǎn)模型的噪音刺激強(qiáng)度和刺激時(shí)間。
　　 二、自擬中藥防治噪音誘導(dǎo)小鼠流產(chǎn)的安胎作用及機(jī)理研究。將受孕小鼠隨機(jī)分為6組。Ⅰ組為正常對(duì)照組,Ⅱ組為噪音模型組。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ組于小鼠孕第3d開始,每天每只用100dB的噪音刺激5h,連續(xù)7d,各組試驗(yàn)鼠于孕第10d剖殺。Ⅰ、Ⅱ組小鼠于孕第4-8d每天灌服PBS0.4mL;Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ組小鼠于孕第4-8d每天分別

4、各灌石菖蒲煎劑、槲皮素+乙酸龍腦酯藥液、黃芩+白術(shù)及自擬中藥組方煎劑各0.4mL。所有試驗(yàn)鼠均于孕10d時(shí)眼球摘除放血后頸椎脫臼處死。打開腹腔,暴露子宮,觀察子宮生長(zhǎng)情況,記錄胚胎著床數(shù)和發(fā)生胚胎吸收的死胚數(shù)。在冰盒上取出完整子宮,剪下周圍脂肪及附屬物,稱重,然后縱向剖開子宮腔,剝離胎兒、胎膜后再稱量子宮凈重。右側(cè)子宮剪下后稱重,加入6倍量含蛋白酶抑制劑0.751μg/mL的pH7.4磷酸緩沖液,在冰水環(huán)境中立即進(jìn)行子宮組織勻漿,4℃,

5、12000rpm,離心15min。取出上清液分裝,于超低溫冰箱-80℃保存,用于測(cè)定IL-2,IFN-γ,IL-4,IL-10和NOS。
　　 結(jié)果表明,自擬中藥對(duì)噪音誘導(dǎo)妊娠小鼠流產(chǎn)有一定保胎作用。Ⅰ組無(wú)噪音影響,流產(chǎn)率為0.0%,胚胎吸收比率6.45%;Ⅱ組100dB導(dǎo)致絕大多數(shù)妊娠小鼠流產(chǎn),妊娠剖檢,子宮內(nèi)無(wú)胎兒,無(wú)法計(jì)算死胎數(shù)。Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ和Ⅵ組小鼠于孕第4-8d每天分別各灌石菖蒲煎劑、槲皮素+乙酸龍腦酯藥液、黃芩+白術(shù)及

6、自擬中藥組方煎劑各0.4mL,流產(chǎn)率分別是50.0%、80.0%、50.0%、30.0%胚胎吸收比率分別是48.15%、72.94%、50.00%、13.18%。Ⅲ和Ⅴ組小鼠流產(chǎn)率、胚胎吸收率顯著低于Ⅱ組(p<0.05);Ⅴ組小鼠流產(chǎn)率、胚胎吸收率與Ⅱ組差異不顯著(p>0.05);Ⅵ組小鼠流產(chǎn)率、胚胎吸收率顯著低于Ⅱ組(p<0.01)。Ⅵ組與其它中藥組之間差異顯著(p<0.05)。說明白擬中藥對(duì)噪音誘導(dǎo)流產(chǎn)保胎具有一定的效果。
　

7、　 小鼠子宮組織勻漿中的IL-2、IFN-γ、NOS的活性含量Ⅵ組高于Ⅰ組(p<0.01),Ⅵ組低于Ⅱ組(p<0.05),Ⅲ組和Ⅴ組明顯高于Ⅰ組(p<0.05),Ⅲ組和Ⅴ組低于Ⅱ組(p<0.05),Ⅳ組高于Ⅰ組,差異極顯著(p<0.01),Ⅳ組稍低于Ⅱ組,無(wú)明顯差異(p>0.05),與Ⅲ和Ⅴ組差異顯著(p<0.05)與Ⅵ差異極顯著(p<0.01)。Ⅵ組低于Ⅱ組,差異極顯著(p<0.01)。同樣IL-4、IL-10小鼠子宮組織勻漿中含量

8、低于Ⅰ組和高于Ⅱ組。Ⅵ組與其它中藥組之間差異顯著(p<0.05)。
　　 結(jié)論:本試驗(yàn)用噪音誘導(dǎo)小鼠流產(chǎn),隨著噪音分貝的增大,小鼠的流產(chǎn)率和胚胎丟失率逐漸增高,使小鼠大部分發(fā)生流產(chǎn)。胚胎吸收率上升,使小鼠機(jī)體Th1/Th2平衡偏向Th1型反應(yīng),導(dǎo)致免疫排斥而誘發(fā)小鼠流產(chǎn),對(duì)生產(chǎn)中常見的噪音造成的妊娠失敗而言,是良好的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。石菖蒲煎劑、槲皮?乙酸龍腦酯藥液、黃芩+白術(shù)及自擬中藥組方流產(chǎn)率、胚胎吸收率低于噪音模型組。因此,自擬