中藥有效成分復(fù)方對糖尿病腎病的作用及作用機(jī)理研究.pdf

1、目的：本課題利用TPS、LBP、杜仲葉水提物制成中藥復(fù)方，研究其對2型糖尿病模型動物的降血糖作用及DN相關(guān)指標(biāo)的影響，結(jié)合復(fù)方對體外胰島細(xì)胞的影響研究，探討復(fù)方在DN發(fā)生發(fā)展中的作用及其機(jī)理，為預(yù)防、治療DN新藥的開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。 方法：1體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：采用高脂飼料結(jié)合小劑量STZ建立2型糖尿病大鼠模型。試驗(yàn)分為6組：正常對照組(C)；模型對照組(D)；復(fù)方低劑量組(D+AL);復(fù)方中劑量組(D+AM)；復(fù)方高劑量組(D+AH

2、)；LBP組。持續(xù)灌胃1個月后，測定大鼠體重、血糖、胰島素、尿肌酐(Ucr)、尿蛋白(UPr)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、總抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽(GSH)、糖化血紅蛋白(HbAlc)、糖基化終產(chǎn)物(AGEs)、醛糖還原酶(AR)、蛋白激酶C(PKC)等生化指標(biāo)，免疫組化法觀察腎組織轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)表達(dá)等。2體外實(shí)驗(yàn)：觀察復(fù)方對體外培養(yǎng)胰島細(xì)胞功能的影響。應(yīng)用體外單

3、層培養(yǎng)大鼠胰島細(xì)胞，檢測不同濃度復(fù)方對細(xì)胞胰島素分泌、胰島細(xì)胞增殖等的影響。 結(jié)果：1一般指標(biāo)：干預(yù)后大鼠病情好轉(zhuǎn)，干預(yù)組大鼠體重、胰島素、ISI顯著高于模型對照組(P<0.05)，而空腹血糖、糖耐量、腎肥大指數(shù)、腎重、TG、TC、HbAlc、LP(a)較模型對照組顯著降低(P<0.05)；2腎功能指標(biāo)：與模型對照組相比，干預(yù)組大鼠BUN、Ccr、24hUPr、Scr水平顯著降低(P<0.05)，糖尿病引起的病理改變有不同程度的

4、減輕；3抗氧化指標(biāo)：復(fù)方中、高劑量組T-AOC顯著高于模型對照組(P<0.05)，而GSH升高并不明顯，只有復(fù)方中劑量組與模型對照組比較有顯著性差異(P<0.05)；4 AR、AGEs-P、PKC檢測結(jié)果：干預(yù)組大鼠AR活性、AGEs-P水平、PKC活性、TGF-β的表達(dá)顯著低于模型對照組(P<0.05)；5體外胰島細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果：用復(fù)方及LBP處理胰島細(xì)胞，胰島素分泌、培養(yǎng)液SOD活性明顯高于空白對照組(P<0.05)，復(fù)方處理組MDA

5、含量呈下降趨勢，其中高劑量組顯著低于空白對照組(P<0.05)，復(fù)方中、高劑量組細(xì)胞的增殖作用較空白對照組明顯增強(qiáng)(P<0.05)。 結(jié)論：復(fù)方可以明顯降低模型大鼠血糖，促進(jìn)胰島細(xì)胞分泌胰島素，提高機(jī)體對胰島素的敏感性，降低TG、TC、BUN、Ccr、24hUPr、Scr等生化指標(biāo)，同時能減輕2型可能與改善模型大鼠糖、脂肪代謝紊亂，減輕氧化應(yīng)激，下調(diào)TGF-β、PKC、AR、AGEs的表達(dá)，促進(jìn)胰島細(xì)胞增殖有關(guān)。如將其作為治療糖