新降糖顆粒對(duì)2型糖尿病大鼠糖脂代謝的影響及肝腎保護(hù)作用的初步研究.pdf

1、目的：
　　新降糖顆粒為自主研發(fā)產(chǎn)品，通過高脂飼養(yǎng)聯(lián)合腹腔注射STZ誘導(dǎo)建立2型糖尿病大鼠模型，探討新降糖顆粒對(duì)2型糖尿病大鼠糖脂代謝的影響及肝腎保護(hù)作用的初步研究。
　　方法：
　　50只雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組（8只，普通飼料）及實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組大鼠采用高脂飼料喂養(yǎng)四周后，一次性腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）40mg·kg-1建立2型糖尿病模型大鼠，建模成功后，隨機(jī)分為模型組，二甲雙胍組（0.15g·kg-1），

2、新降糖顆粒高、低劑量組（12.64 g·kg-1、6.32 g·kg-1），每組8只。實(shí)驗(yàn)組大鼠建模成功后每天灌胃給藥1次，連續(xù)8周。給藥8周后：
　?、俜Q量大鼠體重、攝水量、攝食量，按葡萄糖氧化酶法檢測(cè)空腹血糖（FBG）；放免法檢測(cè)空腹胰島素（FINS）；內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)模型法檢測(cè)胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）；比色法檢測(cè)糖化血紅蛋白（HbAlc）、肝糖原、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG），糖代謝關(guān)鍵酶己糖激酶（HK）、果糖-6-

3、磷酸激酶（PFK）、丙酮酸激酶（PK）及葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G-6-PDH）活性；選擇性沉淀法檢測(cè)高密度脂蛋白-膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白-膽固醇（LDL-C）。
　?、诎磳?shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)肝臟磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）、葡萄糖-6-磷酸酶（G6Pase）、叉頭轉(zhuǎn)錄因子1（FOXO1） mRNA的表達(dá)量；蛋白印跡法檢測(cè)FOXO1蛋白的表達(dá)量。
　　③按微板法檢測(cè)肝功能指標(biāo)ALT、AST、ALP；比

4、色法檢測(cè)γ-GT，肝組織中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、過氧化氫酶（CAT）；羥胺法檢測(cè)超氧化物歧化酶（SOD）；硫代巴比妥酸法檢測(cè)丙二醛（MDA）；肝組織用HE染色。
　　④按二乙酰肟法檢測(cè)尿素氮（BUN）；肌氨酸氧化酶法檢測(cè)血肌酐（SCr）；比色法檢測(cè)腎組織中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、過氧化氫酶（CAT）；羥胺法檢測(cè)超氧化物歧化酶（SOD）；硫代巴比妥酸法檢測(cè)丙二醛（MDA）；酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清晚期糖基化終

5、末產(chǎn)物（AGEs）；腎組織用HE染色；實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)腎臟轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）、纖溶酶原激活物抑制物（PAI-1）、晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（RAGE）mRNA的表達(dá)量。
　　結(jié)果：
　?、偬侵x指標(biāo)顯示：與模型組比較，新降糖顆粒高、低劑量組大鼠攝食量、攝水量、FBG、HOMA-IR、血脂TC、TG及LDL-C均明顯降低（P<0.05，P<0.01）；體重、肝糖原含量、血脂HDL-C、糖代謝關(guān)鍵酶HK、P

6、FK、PK及G-6-PDH活性均明顯升高（P<0.05，P<0.01）；高劑量組大鼠FINS及HbA1c均明顯降低（P<0.05，P<0.01），低劑量組大鼠TC及TG明顯降低（P<0.05，P<0.01）。HDL-C明顯升高（P<0.05，P<0.01）；低劑量組大鼠FINS及HbA1c有所降低，高劑量組大鼠TC及TG有一定程度降低，HDL-C有一定程度升高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　?、谔钱惿笜?biāo)顯示：與模型組比較，

7、新降糖顆粒高、低劑量組大鼠肝臟PEPCK、G6Pase及FOXO1 mRNA、FOXO1蛋白表達(dá)量均明顯降低（P<0.05，P<0.01）。
　　③肝損傷指標(biāo)顯示：與模型組比較，新降糖顆粒高、低劑量組大鼠肝功能相
　　關(guān)指標(biāo)ALT、AST、γ-GT及氧化應(yīng)激MDA含量均明顯降低（P<0.05，P<0.01）；肝臟氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)SOD、GSH-Px及CAT活性均明顯升高（P<0.05，P<0.01），低劑量組大鼠血清ALP均

8、明顯降低（P<0.01），肝細(xì)胞排列較規(guī)則，大部分肝細(xì)胞正常，脂肪變性與空泡變性較模型組少；高劑量組大鼠血清ALP有一定程度下降，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　④腎損傷指標(biāo)顯示：與模型組比較，新降糖顆粒高、低劑量組大鼠BUN及Scr、MDA含量、血清AGEs水平、PAI-1及TGF-β1 mRNA表達(dá)量明顯降低（P<0.05，P<0.01）；腎臟SOD及CAT活性均明顯升高（P<0.05，P<0.01），低劑量組大鼠腎臟G

9、SH-Px活性明顯升高（P<0.01），腎小球結(jié)構(gòu)相對(duì)清晰，腫脹減輕，系膜細(xì)胞及基質(zhì)少量增多，球囊壁相對(duì)光滑，腎小管細(xì)胞肥大、空泡狀態(tài)明顯改善，高劑量組大鼠腎臟GSH-Px活性有一定程度升高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　新降糖顆粒能有效改善2型糖尿病大鼠的病情，推測(cè)其機(jī)制可能是新降糖顆粒抑制肝臟PEPCK、G6Pase及FOXO1 mRNA及FOXO1蛋白表達(dá)水平、增強(qiáng)肝臟糖代謝關(guān)鍵酶HK、PFK、PK