發(fā)育早期暴露雙酚A對青春期大鼠脂代謝及其關鍵酶影響的實驗研究.pdf

1、近年來，兒童和成人肥胖的發(fā)病率不斷增高，已成為嚴重危害人體健康的主要公共衛(wèi)生問題。醫(yī)學界認為，造成人體肥胖的主要原因是能量的攝入大于消耗，即攝食過多和缺乏運動是造成肥胖的關鍵因素。最近動物實驗顯示，生命早期暴露某些環(huán)境內(nèi)分泌干擾物(Environmental Endocrine Disruptors，EEDs)能干擾脂肪代謝和能量平衡調(diào)節(jié)機制，從而引起肥胖;但EEDs引起肥胖的細胞和分子機制尚不清楚。因此，探討EEDs和肥胖的關系及機制

2、成為目前研究肥胖的熱點。
　　 雙酚A(Bisphenol A，BPA)是環(huán)境中普遍存在的一種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物，是聚碳酸脂塑料和環(huán)氧樹脂生產(chǎn)的關鍵單體，廣泛用于塑料和橡膠的生產(chǎn)，如嬰兒奶瓶、食品和飲料罐的內(nèi)壁表層中，對人類健康造成了極大的威脅。人群研究顯示，被調(diào)查者尿中BPA的濃度與肥胖、糖尿病的發(fā)生率存在正相關關系。動物實驗也證實了BPA可以由母體經(jīng)胎盤和乳汁傳遞給子代，擾亂子代的正常發(fā)育。目前，有關BPA干擾能量代謝與脂代謝

3、的研究國內(nèi)外開展的比較少。本實驗采用模擬人類飲水暴露BPA的途徑，通過動物實驗，母鼠在孕期和哺乳期通過飲水方式暴露低、高劑量BPA，研究其對子代大鼠脂代謝的影響及其相關機制。為進一步探討環(huán)境雌激素在肥胖及糖尿病發(fā)病中的作用及可能機制，采取有針對性防治措施提供參考依據(jù)。
　　 目的：
　　 探討生命早期暴露低、高劑量BPA對青春期大鼠血脂水平、脂代謝關鍵酶基因的影響，為闡述發(fā)育早期暴露BPA與肥胖相關并發(fā)癥的關系及可能機制

4、提供科學依據(jù)。
　　 方法：
　　 健康SD雌性大鼠30只，體重200-250 g;SD雄性大鼠15只，體重250-350 g購于中國醫(yī)科大學動物中心，清潔級動物。雌、雄SD大鼠分籠喂養(yǎng)，適應性喂養(yǎng)一周后，每日晚8時按雌雄性別比例2∶1合籠交配，次日清晨對雌性大鼠陰道涂片檢查精子，凡查到精子雌性大鼠定為妊娠第0天(gestation day0，GD0)，采用2周內(nèi)懷孕的大鼠，按體重隨機分為3組，即對照組、低劑量組和高劑量

5、組，單籠飼養(yǎng)，自由攝食和飲水。實驗組大鼠從妊娠第6天(GD6)開始飲用含1mg/L和10mg/L BPA的涼開水，至哺乳期結(jié)束（即子鼠出生后第21天，PND21），對照組則飲用含1％無水乙醇的涼開水。每天記錄各組飲水量，每周記錄子鼠體重及攝食量，直至大鼠斷乳后4周。實驗結(jié)束時大鼠腹主動脈采血，分離血清。采集肝、生殖器、腎臟、生殖器周圍脂肪組織并稱重。測定血脂水平，測定生殖器周圍脂肪組織脂代謝關鍵酶mRNA的表達水平。
　　 結(jié)果

6、：
　　 1、發(fā)育早期暴露BPA對大鼠體重的影響與對照組比較，暴露BPA組大鼠出生體重明顯增加;在哺乳期內(nèi)，暴露BPA組雌性大鼠體重明顯增加，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);雄鼠體重也有增加，但沒有統(tǒng)計學差異(P＞0.05);從斷乳后第1周到第4周末，低、高劑量組雌性大鼠體重均明顯增加，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01或P＜0.05)，高劑量組雄性大鼠體重高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，從斷乳后第三周開始，低劑量

7、組雄性大鼠體重也高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 2、發(fā)育早期暴露BPA對大鼠主要臟器系數(shù)及生殖器周圍脂肪系數(shù)的影響與對照組比較，暴露BPA組雌、雄性大鼠的肝系數(shù)均升高，雌性大鼠生殖器周圍脂肪系數(shù)升高，雄性大鼠生殖器周圍脂肪系數(shù)降低，以上差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，而雌性大鼠生殖器系數(shù)（子宮+卵巢）、腎系數(shù)沒有明顯變化(P＞0.05);低劑量暴露BPA組雄性大鼠腎系數(shù)升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.0

8、5)，而生殖器系數(shù)（睪丸+附睪）無明顯變化(P＞0.05)。
　　 3、發(fā)育早期暴露BPA對大鼠血脂水平的影響與對照組比較，暴露BPA組雌性大鼠甘油三酯、總膽固醇水平明顯升高，高密度脂蛋白明顯下降，以上差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05或P＜0.01);暴露BPA組雄性大鼠總膽固醇含量明顯升高(P＜0.05或P＜0.01)，其余指標與對照組比較無明顯的差異(P＞0.05)。
　　 4、發(fā)育早期暴露BPA對大鼠生殖器周圍脂肪

9、脂代謝關鍵酶mRNA表達水平的影響與對照組雌性大鼠比較，暴露BPA組雌性大鼠生殖器周圍脂肪組織FASmRNA和ACC1mRNA表達水平升高，HSL mRNA表達水平降低，以上差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05或P＜0.01);與對照組雄性大鼠比較，暴露BPA組雄性大鼠生殖器周圍脂肪組織ACC1 mRNA表達水平升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，ATGL mRNA表達水平有降低趨勢，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　

10、結(jié)論：
　　 1、發(fā)育早期暴露低或高劑量BPA對大鼠體重影響有明顯性別差異;低或高劑量BPA可導致雌性大鼠出生體重增加，并持續(xù)至青春期;低劑量BPA使雄性大鼠從斷乳后第3周開始體重明顯增加，高劑量BPA使雄鼠出生體重明顯增高，并持續(xù)至青春期。
　　 2、發(fā)育早期暴露低或高劑量BPA對青春期大鼠血脂的影響有明顯性別差異;低或高劑量BPA導致雌性大鼠甘油三酯、總膽固醇水平明顯增高，高密度脂蛋白水平明顯降低;低或高劑量BPA僅