大鼠新生期脂多糖暴露對睪丸發(fā)育的影響.pdf

1、目的
　　觀察大鼠新生期脂多糖(LPS)暴露對睪丸發(fā)育的影響，探討新生期內(nèi)毒素血癥對雄性生殖的潛在危害。
　　方法
　　選用新生健康雄性SD大鼠，隨機分為對照組和實驗組，實驗組于生后第4～12d期間，隔日腹腔注射脂多糖(75μg/kg，溶于生理鹽水中)，共5次，復(fù)制內(nèi)毒素損傷模型，對照組在相同時間腹腔注射等體積生理鹽水。兩組注射后均常規(guī)飼養(yǎng)至生后21d、PSd(preputial separation day,包皮分離

2、日)、60d、77d稱取體重后，分批處死，摘取雙側(cè)睪丸，睪丸稱重后，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片，分別行HE染色和免疫組化染色，光鏡觀察睪丸組織病理變化及增殖細胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)和波形蛋白(vimentin, Vim)的表達分布情況。
　　結(jié)果
　　1.兩組各日

3、齡大鼠的體重、睪丸重量、睪丸臟器系數(shù)及睪丸體積隨日齡增加而增加。包皮分離日實驗組大鼠的睪丸重量，睪丸最大縱、橫徑，睪丸臟器系數(shù)以及睪丸體積與同齡對照組相比，均下降，差異有顯著性(P<0.05)；60日齡實驗組大鼠睪丸最大縱徑變小，與同齡對照組相比，差異有顯著性(P<0.05)。
　　2. HE染色結(jié)果：對照組大鼠的生精小管分布均勻，生精上皮規(guī)則，各級生精細胞排列整齊，60日齡及77日齡大鼠管腔中可以見到大量精子。兩組大鼠的生精小管

4、直徑隨日齡增加而增加。與同日齡對照組大鼠的生精小管直徑相比，實驗組大鼠的生精小管直徑變小。實驗組可見生精上皮脫落、變薄，生精細胞排列紊亂，嚴重者生精小管被大量脫落的生精細胞團填塞。
　　3.免疫組化檢測結(jié)果：（1）對照組波形蛋白染色陽性反應(yīng)從生精小管基膜圍繞支持細胞核形成棕黃色的環(huán),并呈輻射狀延伸至管腔；實驗組的波形蛋白表達減少或消失，伸至管腔的微絲明顯變短。（2）增殖細胞核抗原(PCNA)陽性細胞主要是精原細胞和初級精母細胞，陽

5、性產(chǎn)物位于細胞核，呈棕黃色、顆粒狀；實驗組在上述部位的表達量減少。（3）誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)陽性反應(yīng)見于支持細胞、睪丸間質(zhì)細胞、管周肌樣細胞，實驗組在支持細胞和管周肌樣細胞表達明顯增強。
　　結(jié)論
　　1.大鼠新生期脂多糖暴露可改變支持細胞波形蛋白的表達和分布，破壞支持細胞的骨架結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致生精細胞脫落進而損害生精過程，這種損害作用可延續(xù)至成年期。
　　2.大鼠新生期脂多糖暴露可致睪丸組織內(nèi)iNOS表達增加、P