大鼠新生期脂多糖暴露對(duì)睪丸發(fā)育的影響.pdf

1、目的
　　觀察大鼠新生期脂多糖(LPS)暴露對(duì)睪丸發(fā)育的影響，探討新生期內(nèi)毒素血癥對(duì)雄性生殖的潛在危害。
　　方法
　　選用新生健康雄性SD大鼠，隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組于生后第4～12d期間，隔日腹腔注射脂多糖(75μg/kg，溶于生理鹽水中)，共5次，復(fù)制內(nèi)毒素?fù)p傷模型，對(duì)照組在相同時(shí)間腹腔注射等體積生理鹽水。兩組注射后均常規(guī)飼養(yǎng)至生后21d、PSd(preputial separation day,包皮分離

2、日)、60d、77d稱取體重后，分批處死，摘取雙側(cè)睪丸，睪丸稱重后，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片，分別行HE染色和免疫組化染色，光鏡觀察睪丸組織病理變化及增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)和波形蛋白(vimentin, Vim)的表達(dá)分布情況。
　　結(jié)果
　　1.兩組各日

3、齡大鼠的體重、睪丸重量、睪丸臟器系數(shù)及睪丸體積隨日齡增加而增加。包皮分離日實(shí)驗(yàn)組大鼠的睪丸重量，睪丸最大縱、橫徑，睪丸臟器系數(shù)以及睪丸體積與同齡對(duì)照組相比，均下降，差異有顯著性(P<0.05)；60日齡實(shí)驗(yàn)組大鼠睪丸最大縱徑變小，與同齡對(duì)照組相比，差異有顯著性(P<0.05)。
　　2. HE染色結(jié)果：對(duì)照組大鼠的生精小管分布均勻，生精上皮規(guī)則，各級(jí)生精細(xì)胞排列整齊，60日齡及77日齡大鼠管腔中可以見到大量精子。兩組大鼠的生精小管

4、直徑隨日齡增加而增加。與同日齡對(duì)照組大鼠的生精小管直徑相比，實(shí)驗(yàn)組大鼠的生精小管直徑變小。實(shí)驗(yàn)組可見生精上皮脫落、變薄，生精細(xì)胞排列紊亂，嚴(yán)重者生精小管被大量脫落的生精細(xì)胞團(tuán)填塞。
　　3.免疫組化檢測結(jié)果：（1）對(duì)照組波形蛋白染色陽性反應(yīng)從生精小管基膜圍繞支持細(xì)胞核形成棕黃色的環(huán),并呈輻射狀延伸至管腔；實(shí)驗(yàn)組的波形蛋白表達(dá)減少或消失，伸至管腔的微絲明顯變短。（2）增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)陽性細(xì)胞主要是精原細(xì)胞和初級(jí)精母細(xì)胞，陽

5、性產(chǎn)物位于細(xì)胞核，呈棕黃色、顆粒狀；實(shí)驗(yàn)組在上述部位的表達(dá)量減少。（3）誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)陽性反應(yīng)見于支持細(xì)胞、睪丸間質(zhì)細(xì)胞、管周肌樣細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)組在支持細(xì)胞和管周肌樣細(xì)胞表達(dá)明顯增強(qiáng)。
　　結(jié)論
　　1.大鼠新生期脂多糖暴露可改變支持細(xì)胞波形蛋白的表達(dá)和分布，破壞支持細(xì)胞的骨架結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致生精細(xì)胞脫落進(jìn)而損害生精過程，這種損害作用可延續(xù)至成年期。
　　2.大鼠新生期脂多糖暴露可致睪丸組織內(nèi)iNOS表達(dá)增加、P