食品中赭曲霉素A的免疫組抗傳感器建立的研究.pdf

1、摘要II摘要摘要赭曲霉毒素A（OchratoxinA，OTA）污染廣泛，毒性強(qiáng)，主要存在于農(nóng)產(chǎn)品中，與人類健康有著密切的關(guān)系。由于OTA的巨大危害，世界各國(guó)加強(qiáng)了對(duì)于食品中OTA含量的嚴(yán)格管控。高效液相色譜法和酶聯(lián)免疫吸附法是常見檢測(cè)OTA的方法，但是這兩種檢測(cè)技術(shù)都存在一定的缺陷，如檢測(cè)成本高，操作過程繁瑣且需專業(yè)人士操作等。本研究為了解決這些問題，設(shè)計(jì)了檢測(cè)靈敏，快速和操作簡(jiǎn)便的OTA非標(biāo)記免疫阻抗傳感器。本研究通過Hummer方法

2、制備氧化石墨烯，利用一步電沉積法制備層狀結(jié)構(gòu)還原氧化石墨烯金納米復(fù)合物修飾的玻碳電極，金納米穿插于石墨烯片層中，將石墨烯架空，有效增大了復(fù)合物的比表面積。隨后采用EDCNHS分別將抗OTA駝源性納米抗體和抗OTA單克隆抗體共價(jià)偶聯(lián)于修飾電極表面，制備了OTA免疫阻抗傳感器。1基于基于OTA的單克隆抗體免疫傳感器的研究的單克隆抗體免疫傳感器的研究1.1采用Hummer方法成功制備得到氧化石墨烯，其厚度在1nm左右。通過一步電沉積方法制備層

3、狀結(jié)構(gòu)的還原氧化石墨烯納米金復(fù)合物修飾電極，對(duì)沉積條件的進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果為氧化石墨烯濃度0.5mgmL，氯金酸的濃度是1mM，循環(huán)伏安法沉積圈數(shù)為5圈。1.2采用循環(huán)伏安法將還原氧化石墨烯金納米復(fù)合物一步沉積至電極表面，并共價(jià)偶聯(lián)抗OTA單克隆抗體，制備了OTA免疫阻抗傳感器。該傳感器對(duì)OTA的檢測(cè)線性方程是y=194x183.1（y是阻抗變化值ΔRet，x是OTA的濃度對(duì)數(shù)，即log[OTA]），線性范圍0.520ngmL，最低檢測(cè)限為

4、0.35ngmL，對(duì)陰性樣品加標(biāo)回收率75%101%。2基于基于OTA的納米抗體免疫阻抗傳感器的研究的納米抗體免疫阻抗傳感器的研究2.1采用EDCNHS將抗OTA納米抗體共價(jià)修飾于電極表面，通過優(yōu)化EDC與NHS的反應(yīng)濃度比為8:1，反應(yīng)時(shí)間50min，建立的Nb免疫阻抗傳感器，檢測(cè)線性方程是y=224x546.5（y是阻抗變化值ΔRet，x是OTA的濃度對(duì)數(shù)，即log[OTA]）），線性范圍0.011ngmL，最低檢測(cè)限0.005ng