抗赭曲霉毒素A單克隆抗體的研制及其ELISA檢測方法的初步建立.pdf

1、赭曲霉毒素A(OA)是曲霉菌屬和青霉菌屬的某些產(chǎn)毒菌株的次級代謝產(chǎn)物，對農(nóng)作物的污染在全球范圍內(nèi)都比較嚴(yán)重，是一種強(qiáng)烈的腎毒素和肝毒素，還具有免疫抑制性，并有致畸、致癌和致突變的作用。 目前OA的檢測技術(shù)主要有儀器法和免疫分析技術(shù)。儀器法主要有薄層色譜法，高效液相色譜法以及質(zhì)譜聯(lián)合法等，這些方法樣品處理繁瑣費(fèi)時(shí)，成本高，而且需要有經(jīng)過專門訓(xùn)練的專業(yè)人員來操作復(fù)雜的儀器設(shè)備，不適合大批量樣品的測定。免疫分析技術(shù)主要是酶聯(lián)免疫吸附測

2、定(ELISA)，作為一種快速、靈敏、特異的檢測方法，正逐漸應(yīng)用于毒素的殘留檢測。本研究通過抗原的合成和抗赭曲霉毒素A單克隆抗體的研制，建立了OA的ELISA檢測方法。 利用試劑盒偶聯(lián)的OA-BSA為免疫原免疫6周齡BALB/c小鼠，采其脾細(xì)胞與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞融合，用間接EIASA以及間接競爭ELISA篩選，經(jīng)五次亞克隆得到了穩(wěn)定分泌抗OA單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株D6。特異性試驗(yàn)證明D6株單抗有較強(qiáng)的特異性。 依照