超聲波降解對(duì)大粒車前子多糖流變性質(zhì)、溶液構(gòu)象及生物活性的影響.pdf

1、目的：研究超聲波對(duì)大粒車前子多糖溶液流變性質(zhì)、溶液構(gòu)象、抗氧化活性、體外免疫活性、改善結(jié)腸炎癥功能的影響。
　　方法：用功率300 w，頻率20 kHz的超聲波對(duì)10 mg/ml大粒車前子多糖分別處理0 s，15 s，30 s，1 min，2 min；用流變儀（溫度25℃，直徑50 mm不銹鋼平板）測(cè)定樣品剪切速率1~1000S-1下的表觀粘度；使用流變儀檢測(cè)不同超聲時(shí)間下多糖的彈性模量、粘性模量G″及其對(duì)于剪切頻率的依賴性。使用

2、SEC-MALS系統(tǒng)檢測(cè)樣品的分子量Mw，分子量分布 Mw/Mn，均方根半徑，流體力學(xué)半徑及結(jié)構(gòu)參數(shù)，特性粘度， Mark-Houwinkα常數(shù)，并通過這些參數(shù)判斷多糖溶液構(gòu)象隨超聲波解聚的變化。通過檢測(cè)多糖的DPPH值、FRAP值、ORAC值評(píng)價(jià)超聲波降解對(duì)大粒車前子多糖的抗氧化能力的影響。體外培養(yǎng)細(xì)胞RAW264.7，通過多糖促進(jìn)細(xì)胞增殖、吞噬、產(chǎn)生NO及TNF-α的能力評(píng)價(jià)超聲對(duì)車前子多糖對(duì)巨噬細(xì)胞的免疫活性的影響。誘導(dǎo)脾T、B淋

3、巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)一同評(píng)價(jià)超聲前后多糖對(duì)脾細(xì)胞的活性。通過建立小鼠急性結(jié)腸炎模型，研究降解前后，大粒車前子多糖改善小鼠腸道炎癥功能的改變。
　　結(jié)果：超聲處理能夠降低大粒車前子多糖的表觀粘度，消除剪切稀化現(xiàn)象使流體性質(zhì)變?yōu)榻咏谂ｎD型流體；超聲后大粒車前子多糖的彈性模量與粘性模量均出現(xiàn)下降的趨勢(shì)，相位角正切提高，從而改變了多糖的凝膠性質(zhì)；超聲使多糖分子量下降，多分散系數(shù)隨超聲時(shí)間的增加先增后減；隨超聲時(shí)間的增加，車前子多糖流體力學(xué)半徑

4、Rh，均方根半徑Rg，結(jié)構(gòu)參數(shù)ρ均減小，Mark-Houwinkα常數(shù)增大,溶液構(gòu)象從高支化結(jié)構(gòu)向柔性的無規(guī)則線團(tuán)轉(zhuǎn)變；超聲可以顯著提高車前子多糖的DPPH值， FRAC值，而對(duì)ORAC值的影響不顯著；超聲后多糖刺激巨噬細(xì)胞吞噬、增殖分泌NO的能力均顯著提高，是多糖促進(jìn)巨噬細(xì)胞分泌TNF-α的能力卻發(fā)生了下降；超聲可以顯著增強(qiáng)大粒車前子多糖誘導(dǎo)T、B脾淋巴細(xì)胞增殖的能力；超聲降解能夠顯著提高大粒車前子多糖減緩結(jié)腸炎小鼠以下癥狀的能力：結(jié)