麻黃湯化學成分的解析及其譜效關(guān)系的研究.pdf

1、目的：
　　本實驗運用譜-效結(jié)合方法，采用色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分離鑒別麻黃湯復(fù)方化學組分，并建立麻黃湯水煎液脂溶性和水溶性部位指紋圖譜，結(jié)合發(fā)汗、平喘藥效實驗結(jié)果，采用偏最小二乘回歸（PLSR）法建立復(fù)方譜-效關(guān)系數(shù)學模型。揭示麻黃湯復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　方法：
　　1、應(yīng)用氣相色譜電子轟擊離子源質(zhì)譜（GC-EI/MS）聯(lián)用技術(shù)建立41個麻黃湯不同劑量配比組水煎液脂溶性部位的指紋圖譜。比較色譜圖間差異，各共有峰質(zhì)譜圖通過

2、與NIST標準譜庫比對明確其化學信息，并結(jié)合文獻報道分析成分的藥材歸屬。
　　2、應(yīng)用超高效液相色譜四極桿飛行時間質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF/MS）聯(lián)用技術(shù)建立41個麻黃湯不同劑量配比組水煎液水溶性部位的指紋圖譜。比較色譜圖間差異，MZmine-2.9.1軟件自動提取各共有峰的準分子離子峰m/z值，通過與自建化學成分數(shù)據(jù)庫中成分在[M+H]+模式下的m/z值進行對比，明確其化學信息及藥材歸屬。
　　3、采用著色法研究麻黃湯不

3、同配比組水煎液及各單味藥材于40 min、60 min、80min、100 min、120 min對大鼠足趾汗腺分泌的影響，以汗液增加百分率為評價指標；采用離體氣管螺旋條法研究麻黃湯不同配比組水煎液及各單味藥材對豚鼠離體氣管平滑肌的解痙作用，以解痙百分率為評價指標。
　　4、以脂溶性和水溶性部位41張指紋圖譜中共有峰峰面積為自變量，以不同時間點大鼠足趾部汗滴數(shù)作為譜-效關(guān)系研究的因變量1，以豚鼠離體氣管平滑肌張力下降差值作為作為譜

4、-效關(guān)系研究的因變量2。應(yīng)用PLSR法，建立譜-效關(guān)系數(shù)學模型，根據(jù)得分圖中散點的分布情況對色譜峰進行分類，根據(jù)載荷圖中自變量距原點的位置、權(quán)重系數(shù)的大小，篩選出與發(fā)汗、平喘顯著相關(guān)的特征峰，并明確其化學信息。
　　結(jié)果：
　　1、本文實驗從麻黃湯脂溶性部位共鑒定出包括α-松油醇、肉桂醛、丁香醛、正丁醇等在內(nèi)的40個化學成分，其中主要為揮發(fā)油類成分，主要來源于麻黃和桂枝。
　　2、本文實驗從麻黃湯水溶性部位共鑒定出包括

5、麻黃堿、桂皮酸、苦杏仁苷、甘草酸等在內(nèi)的39個化學成分，其中主要為來源于麻黃的生物堿類成分，來源于桂枝和苦杏仁的有機酸類成分，以及來源于甘草的黃酮類成分。
　　3、發(fā)汗實驗和平喘實驗結(jié)果表明，麻黃為影響全方藥效實驗結(jié)果的最主要因素，對全方發(fā)汗、平喘有顯著的促進作用。此外，桂枝和苦杏仁對全方發(fā)汗、平喘亦有一定的促進作用，而甘草對全方發(fā)汗有一定的抑制作用。
　　4、麻黃湯水煎液與其發(fā)汗、平喘藥效的譜-效關(guān)系研究表明，主成分Com

6、p1~Comp4對發(fā)汗的解釋能力達到85.1％，主成分Co mp1~ Comp5對平喘的解釋能力達到85.8%，其中Comp1對模型的預(yù)測能力最強；主成分載荷圖中與發(fā)汗、平喘藥效實驗結(jié)果關(guān)聯(lián)性較大的色譜峰主要來源于脂溶性指紋圖譜；共篩選121個色譜峰作為麻黃湯發(fā)汗作用的特征峰，21個色譜峰已確定結(jié)構(gòu)信息，180個色譜峰作為麻黃湯平喘作用的特征峰，20個色譜峰已確定結(jié)構(gòu)信息；其中有43個色譜峰對全方發(fā)汗、平喘均有調(diào)控作用。
　　結(jié)論

7、：
　　借助色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，開展了麻黃湯水煎液與其發(fā)汗、平喘藥效的譜效學研究。麻黃湯水煎液中共鑒定出79個化學成分，脂溶性部位主要為揮發(fā)油類成分，水溶性部位主要為生物堿、有機酸、黃酮類成分；篩選出121個色譜峰作為麻黃湯發(fā)汗作用的特征峰，180個色譜峰作為麻黃湯平喘作用的特征峰，其中43個峰為發(fā)汗、平喘藥效共同特征峰，特征峰中27個色譜峰已確定結(jié)構(gòu)信息；主成分載荷圖中對兩者藥效調(diào)控作用較大的成分主要分布于脂溶性部位，提示揮發(fā)油可