酸性茶多糖組分的分離及精細結(jié)構(gòu)研究.pdf

1、茶葉（Camellia sinensis L.O.Kuntze）為山茶科山茶屬植物茶的芽葉，作為茶葉的故鄉(xiāng)，中國是世界產(chǎn)茶大國。茶最初作藥用，后來發(fā)展為飲料。長期研究表明，茶葉含有多種活性化學成分，包括多糖糖類化合物、蛋白質(zhì)、氨基酸、茶多酚、生物堿等。我國江西省婺源一帶盛產(chǎn)綠茶，但茶葉加工的同時，大量粗老茶葉滯銷或積壓，為了避免資源浪費和經(jīng)濟損失，需要進一步加強對粗老茶葉的綜合利用，而多糖作為茶葉的主要活性成分，開展茶多糖的相關(guān)研究是其

2、各項功能活性研究一個重要方面。本論文擬將婺源粗老綠茶作為原料，采用沸水浴法提取茶多糖并進行純化，然后測定其理化性質(zhì)和精細結(jié)構(gòu)特征。主要研究結(jié)論如下：
　　1.采用水提醇沉法從江西婺源粗老綠茶中提取多糖，提取條件為80％乙醇浸泡24h，濾渣烘干后按料液比1:10g/mL在95℃熱水中浸提4h，反復(fù)提取兩次后使用80%乙醇醇沉得到茶葉粗多糖TPSR，結(jié)果顯示茶葉在此條件下多糖的得率是5.6%。使用苯酚-硫酸法測定了TPSR中的糖含量，

3、測得TPSR對葡萄糖的換算因子為2.87，并通過穩(wěn)定性、精密度、重現(xiàn)性和加樣回收率等試驗來驗證了苯酚-硫酸法測定茶多糖糖含量的準確可靠性，確定了一種簡便可行的茶多糖含量的測定方法。
　　2.通過Sevag法脫蛋白對粗多糖進行純化并測定了純化組分的理化性質(zhì)。采取水提醇沉法從茶葉中提取粗多糖，通過Sevag法對粗多糖脫蛋白得到精制多糖TPS，得率為1.5%。通過HPGPC的分析，表明所制備茶多糖TPS為均一多糖，相對分子質(zhì)量約為289

4、734。測得組分中中性糖含量為55.1%，蛋白質(zhì)含量為1.8%。GC分析確定茶多糖主要由鼠李糖、核糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖組成，其摩爾比為1.26:3.18:4.08:1.00:1.52:3.92。離子色譜分析得出茶多糖中含有半乳糖醛酸，含量為33.5%。13種氨基酸可在樣品中檢測到，丙氨酸（Ala）含量最高?？疾鞓悠返淖贤夂图t外光譜掃描，證實TPS是一種酸性糖蛋白，且結(jié)構(gòu)中含有吡喃糖環(huán)。
　　3.對TPS精細結(jié)構(gòu)進行

5、解析。TPS的甲基化分析結(jié)果表明，TPS主要由T-linked Araf（2.8%）、T-linked Ribf（2.1%）、T-linked Glcp（3.3%）、T-linked Galp（5.1%）、1,3-linked Araf（4.9%）、1,2,4-linked Rhap（3.7%）、1,4,6-linked Glcp（3.1%）、1,4-linked GalpA（33.5%）、1,6-linked Glcp（9.6%）和1

6、,3,4-linked Galp（32.2%）等殘基組成。Gal殘基主要以 T-linked Galp、1,4-linked GalpA、1,3,4-linked Galp等形式存在，且1,4-linked GalpA、1,3,4-linked Galp含量較高，推測主鏈由Gal通過1,4-linked方式連接，在其O-3上與分支相連。
　　TPS經(jīng)0.05M TFA水解后得到透析袋內(nèi)液組分TPS-H，主要含有半乳糖（37.4%）

7、、阿拉伯糖（16.2%）和葡萄糖（15.9%）。HPGPC檢測結(jié)果顯示TPS-H為均一組分，相對分子量約為101726。TPS-H的甲基化結(jié)果顯示，與TPS相比，T-linked Araf含量減少，說明TPS末端的T-linked Araf殘基被水解；1,3,4-linked Galp的含量也有所下降，由原來的32.2%降為16.4%。TPS水解前后高含量的1,3,4-linked Galp、1,4-linked GalpA殘基，表明其