響應(yīng)面優(yōu)化高壓均質(zhì)提取黑木耳多糖及其降血脂功能研究.pdf

1、高血脂癥是動(dòng)脈粥樣硬化、心腦血管相關(guān)疾病的主要誘因之一，因此降血脂活性成分的開(kāi)發(fā)成為近年來(lái)研究熱點(diǎn)。黑木耳多糖作為生理活性物質(zhì)，近年來(lái)日益受到人們的重視。本研究以黑木耳為研究對(duì)象，對(duì)其降血脂活性成分進(jìn)行體外篩選，并通過(guò)體內(nèi)用藥進(jìn)行降血脂活性分析，旨在分析其對(duì)高血脂癥的降血脂效果，促進(jìn)黑木耳及其多糖資源的深度開(kāi)發(fā)利用。研究結(jié)果如下:
　　1.采用響應(yīng)面優(yōu)化高壓均質(zhì)法提取黑木耳多糖工藝參數(shù)，根據(jù)優(yōu)化結(jié)果確定提取參數(shù)為:均質(zhì)時(shí)間24.9

2、1min，均質(zhì)壓力24.66MPa，料液比1∶76.15，黑木耳多糖得率理論值可達(dá)40.74％。
　　2.通過(guò)高壓均質(zhì)法以響應(yīng)面優(yōu)化參數(shù)為條件，0.1MHC1、蒸餾水、0.1MNaOH作為溶劑提取3種黑木耳多糖，將甘氨膽酸鈉和牛磺膽酸鈉作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，體外模擬胃腸道環(huán)境對(duì)其結(jié)合膽酸鹽能力進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示堿提黑木耳多糖結(jié)合甘氨膽酸鈉和?；悄懰徕c效果最好，酸提黑木耳多糖次之，水提黑木耳多糖結(jié)合率最低;通過(guò)對(duì)堿提黑木耳多糖進(jìn)行乙醇沉淀法

3、分級(jí)，得到50％、60％、70％、80％、90％、100％醇沉的6段堿提黑木耳多糖，并進(jìn)一步分析其體外結(jié)合膽酸鹽能力，結(jié)果表明:70％醇沉的堿提黑木耳多糖(J-70)結(jié)合甘氨膽酸鈉和?；悄懰徕c能力均優(yōu)于其他級(jí)分，因此選其作為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)原料。
　　3.通過(guò)喂食高脂飼料同時(shí)灌胃J-70多糖溶液建立預(yù)防型小鼠高血脂模型，考察黑木耳多糖J-70預(yù)防高血脂作用效果。結(jié)果顯示:J-70對(duì)于長(zhǎng)期食用高脂飼料小鼠具有顯著的降血脂作用。J-70能夠減

4、緩小鼠體重增長(zhǎng)，降低肝臟指數(shù)和動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)，其中高劑量組作用效果極顯著;血脂四項(xiàng)水平顯示J-70能夠升高高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)，降低膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)的含量，其中中劑量組作用顯著，高劑量組作用極顯著，受試物各組小鼠低密度膽固醇(LDL-L)含量也有所降低，但作用效果不顯著;脂代謝相關(guān)酶類(lèi)測(cè)定結(jié)果表明J-70具有升高脂類(lèi)代謝相關(guān)酶卵磷脂?；D(zhuǎn)移酶(LCAT)含量，提高脂蛋白酯酶(LPL)和肝酯酶(HL)活性的作

5、用，且中高劑量組作用極顯著;在抗氧化方面，J-70和劑量組均能顯著能夠升高總超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽還原酶(GSH-PX)的活性，具有一定抗氧化作用。
　　4.通過(guò)喂食高脂飼料方法建立小鼠高血脂模型，模型建成后用J-70進(jìn)行灌胃給藥，對(duì)黑木耳多糖J-70對(duì)高脂模型小鼠的降血脂作用效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:J-70對(duì)于控制小鼠體重增長(zhǎng)均有顯著效果，中高劑量組作用效果極顯著，同時(shí)J-70能夠抑制肝臟指數(shù)的上升，并提高高

6、脂小鼠的脾指數(shù)，進(jìn)而增強(qiáng)其免疫功能;動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)(AI)結(jié)果顯示J-70各組均能夠極顯著降低高血脂小鼠的AI值，說(shuō)明其在一定程度上能夠阻礙高脂小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生;血脂四項(xiàng)水平結(jié)果顯示，J-70能夠降低小鼠的TC、TG及LDL-C水平，中劑量組作用顯著，高劑量組作用極顯著，在升高HDL-C含量方面受試物各組均表現(xiàn)極顯著，說(shuō)明J-70能夠控制高血脂癥小鼠的血脂水平;脂類(lèi)代謝相關(guān)酶類(lèi)測(cè)定結(jié)果顯示:J-70各組均能夠極顯著增加LCAT含

7、量，顯著提高LPL和HL的活性，并呈現(xiàn)一定的劑量依賴;在抗氧化方面，J-70能夠極顯著的升高T-SOD和GSH-Px的活性，有效的治療高血脂癥引起的脂質(zhì)過(guò)氧化損傷。
　　本研究通過(guò)響應(yīng)面法對(duì)高壓均質(zhì)提取黑木耳多糖進(jìn)行工藝優(yōu)化，通過(guò)體外降血脂活性片段篩選得出最優(yōu)組分為J-70（70％乙醇醇沉堿溶液高壓均質(zhì)優(yōu)化參數(shù)下提?。┓治銎潴w外降血脂活性，并創(chuàng)新性的分別對(duì)其降血脂作用的預(yù)防和治療效果進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)黑木耳多糖J-70具有潛在的降血脂