基于DNAzyme信號(hào)放大策略的光學(xué)生物傳感檢測(cè)研究.pdf

1、光學(xué)分析檢測(cè)方法具有簡(jiǎn)便、高效、高速、高靈敏度等優(yōu)勢(shì)。本論文利用熒光法和比色法作為信號(hào)輸出檢測(cè)手段，基于DNAzyme信號(hào)放大技術(shù)，結(jié)合近年來(lái)生物分子檢測(cè)的新方法，設(shè)計(jì)了兩種蛋白酶分子識(shí)別傳感器和DNA生物傳感器，主要開(kāi)展的工作包括以下內(nèi)容:
　　(1)近年來(lái)，科學(xué)家們發(fā)展了基于分子燈標(biāo)或者納米燈標(biāo)作為信號(hào)的熒光法用于T4多核苷酸激酶的檢測(cè)。然而，很多檢測(cè)方法都有一定的局限性，比如沒(méi)有做到信號(hào)的循環(huán)放大來(lái)降低檢測(cè)限。為了克服這個(gè)局

2、限性，我們對(duì)其進(jìn)行了進(jìn)一步的設(shè)計(jì)和改進(jìn)。在原來(lái)的基礎(chǔ)上我們引進(jìn)了Pb2+-DNAzyme結(jié)構(gòu)，在新的莖環(huán)中要包埋著Pb2+-DNAzyme的特定序列，通過(guò)λ外切酶輔助切割釋放出該序列，循環(huán)切割分子燈標(biāo)產(chǎn)生熒光信號(hào)，從而實(shí)現(xiàn)熒光信號(hào)的增強(qiáng)與放大，提高檢測(cè)靈敏度。因此它是一個(gè)非常有前景的傳感器。
　　(2)提高生物傳感器的靈敏度往往有兩種方法:降低背景信號(hào)或增強(qiáng)輸出信號(hào)?？茖W(xué)家們已經(jīng)廣泛通過(guò)應(yīng)用各種酶切靶標(biāo)循環(huán)、滾環(huán)擴(kuò)增等放大方法增強(qiáng)

3、信號(hào)輸出;利用金納米顆粒，碳納米管，和石墨烯氧化物猝滅熒光信號(hào)來(lái)降低信號(hào)背景。但是獲得低背景甚至零背景依然是一個(gè)不小的挑戰(zhàn)。然而到目前為止，很少有人把這兩種策略運(yùn)用到一個(gè)體系中去提高檢測(cè)靈敏度。本實(shí)驗(yàn)中，我們將這兩種策略結(jié)合到一起，成功運(yùn)用于T4多核苷酸激酶的檢測(cè)，并通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)該體系擁有較強(qiáng)的信噪比，因此它是一個(gè)非常有前景的通用型的檢測(cè)平臺(tái)。
　　(3)通過(guò)DNAzyme信號(hào)放大技術(shù)，基于DNA鏈?zhǔn)诫s交，利用納米金顆粒作為信號(hào)輸