基于T7核酸外切酶信號循環(huán)放大的microRNA比色傳感檢測新策略.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、MicroRNA(miRNA)是一類長度為18-23個堿基的內源性、非編碼RNA,它與真核細胞的基因調控有著重要的關系。研究表明,miRNA參與了疾病發(fā)生發(fā)展過程中的信號調節(jié),并且miRNA的異常表達與癌癥,神經(jīng)系統(tǒng)疾病及糖尿病等多種疾病有著緊密的聯(lián)系。作為一種新型的生物標志物,miRNA具有長度短、豐度低及家族同源性高等特性,使得臨床上實現(xiàn)高靈敏檢測miRNA面臨著巨大的挑戰(zhàn)。因此,建立高靈敏的miRNA定量分析方法是目前亟需解決的難

2、題。
  本課題建立了一種基于T7核酸外切酶“信號關閉”的策略,在均相體系中成功實現(xiàn)了對miRNA的可視化檢測。在無靶物質 miRNA存在時,單鏈捕獲探針無法被T7核酸外切酶剪切,打開含有G4序列的發(fā)夾結構探針,吸光度達到最大值;在靶物質miRNA存在時,miRNA與捕獲探針雜交形成DNA/RNA雙鏈,利用T7核酸外切酶,剪切雙鏈中的捕獲探針,使得捕獲探針濃度大大減小,被打開的發(fā)夾探針數(shù)量減少,從而導致信號降低。在最優(yōu)的實驗條件下

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