18772.基于熒光信號放大策略檢測生物大分子和汞離子

1、碩士學位論文論文題目論文題目基于熒光信號放大策略檢測生物大分子和汞離子分類號0657.1單位代碼10447密級無研究生學號1210120206作者姓名呂燕芹呂燕芹專業(yè)名稱分析化學分析化學指導教師姓名劉繼鋒劉繼鋒教授教授學院化學化工學院化學化工學院論文提交日期2015年4月聊城大學碩士學位論文i摘要近年來，在臨床診斷、食品安全和環(huán)境保護等各個社會領域中，對生物分子的超靈敏檢測要求越來越高，構建更為靈敏、精確、經(jīng)濟、簡單的檢測策略已成為生命

2、分析科學領域中研究的重點和熱點。生物分子信號放大技術是利用各種工具酶和納米顆粒等手段發(fā)展起來的一種前沿的分析技術，可對生物分子進行快速、靈敏檢測。本論文利用多種核酸工具酶、納米顆粒以及核酸探針技術等現(xiàn)有的分子生物學技術和手段，主要以核酸、蛋白質等生物大分子和汞離子為研究對象，構建了多種新的熒光信號放大檢測技術平臺，實現(xiàn)了對核酸、蛋白質和汞離子的定量分析。主要內容包括：1、基于核酸適體保護和核酸外切酶循環(huán)放大構建免標記熒光檢測方法檢測凝血

3、酶本章我們基于核酸外切酶Ⅲ輔助循環(huán)放大策略，核酸適體保護機制和鋅原卟啉G四倍體超分子熒光標簽構建了一種簡單的、高靈敏的均相檢測蛋白質的新方法。首先，這一創(chuàng)新性的檢測平臺設計簡單，通過簡單的混合及孵育即可實現(xiàn)，避免了繁瑣的操作過程。通過利用核酸外切酶不但避免了洗滌及離心的過程，而且節(jié)省了時間。其次，適體探針不需要任何修飾和特殊標簽，這不但降低了實驗成本及設計的復雜性，而且保持了其與目標物結合的活性。此外，它對人凝血酶的檢測限可達0.2pM

4、，并且通過改變對應的適體，該方法亦可廣泛應用于其他類型生物分子的檢測。因此，它在生物或臨床目標物檢測中具有很重要的應用價值。2、磁性納米顆粒結合核酸外切酶輔助循環(huán)放大技術構建免標記熒光檢測新方法定量檢測DNA本章我們結合磁性納米顆粒(MNPs)和核酸外切酶III(ExoIII)輔助循環(huán)放大技術構建了一種能檢測超低濃度目標DNA的新方法。我們巧妙設計的抓捕發(fā)卡探針(CHP)集多功能設計于一體，當目標DNA存在時，組裝到磁性納米顆粒上的抓捕