食品及飼料中有機(jī)酸的在線富集離子色譜—質(zhì)譜分析方法研究.pdf

1、有機(jī)酸可作為酸度調(diào)節(jié)劑、抗氧化劑、著色劑和乳化劑等添加到食品及飼料中。但有機(jī)酸的濫用可能會(huì)對(duì)人和動(dòng)物的健康產(chǎn)生危害。因此，建立食品及飼料中有機(jī)酸的簡(jiǎn)便快速、高靈敏度和高準(zhǔn)確度的檢測(cè)分析方法，有利于現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)水平的提高，并為規(guī)范與完善有機(jī)酸的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)提供參考。
　　本文采用在線富集與離子色譜—質(zhì)譜分析技術(shù)相結(jié)合，對(duì)食品及飼料樣品中乳酸、磷酸、檸檬酸、草酸、蘋果酸、焦谷氨酸、甲酸、丙酮酸、丁二酸、D-酒石酸、丙二酸、馬來(lái)酸、富馬酸、

2、α-酮戊二酸、D-奎尼酸和反-烏頭酸等16種有機(jī)酸進(jìn)行定性、定量分析方法研究。主要研究?jī)?nèi)容與結(jié)果如下:
　　1、研發(fā)了新型的分離柱和富集柱，并對(duì)其性能進(jìn)行了評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，兩根柱子的裝填緊密而均勻，柱填料對(duì)16種有機(jī)酸均有吸附性。對(duì)于分離柱，當(dāng)淋洗液流速為1 mL/min時(shí)，柱壓為2235 psi并保持相對(duì)穩(wěn)定;當(dāng)流速為0.5mL/min恒流洗脫時(shí)，死時(shí)間t0為5.73 min;在相同的分析條件下，各有機(jī)酸的保留時(shí)間均大于死時(shí)間。

3、采用濃度為0～80.0 mmol/L的NaOH溶液進(jìn)行梯度洗脫，各有機(jī)酸的塔板數(shù)N為3017～26722，馬來(lái)酸與富馬酸的分離度R為1.94，16種有機(jī)酸的保留時(shí)間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD值為0.09％～1.25％，峰面積的RSD值為1.2％～2.8％，表明該分離柱對(duì)目標(biāo)化合物能進(jìn)行有效分離。富集柱的富集能力可達(dá)到100000 ng，可確保對(duì)有機(jī)酸的有效在線富集。
　　2、研究和優(yōu)化了在線富集離子色譜—質(zhì)譜同時(shí)分析測(cè)定16種有機(jī)酸的最佳

4、條件:色譜柱為自制富集柱(20 mm×4.6 mm)和分離柱(250 mm×1.0 mm);淋洗液為NaOH溶液，梯度洗脫程序?yàn)?-3 min，0-10.0 mmol/L（線性梯度）;3-5min,10.0 mmol/L;5-10 min,20.0 mmol/L;10-15 min,30.0 mmol/L;15-18 min,40.0 mmol/L;18-21 min,50.0 mmol/L;21-24 min,60.0 mmol/L;

5、24-26.5 min,80.0 mmol/L;26.5-35 min，0.0 mmol/L，流速為0.45 mL/min;離子源為大氣壓化學(xué)電離源;掃描模式為負(fù)離子模式;錐孔電壓為D-奎尼酸70 V，反-烏頭酸20V，其余14種有機(jī)酸均為40 V;在線富集時(shí)間為3.0 min;進(jìn)樣體積為200μL。在該條件下，16種有機(jī)酸的檢出限為0.01～0.22 mg/L;果汁樣品中有機(jī)酸的平均回收率為80.5～109.8％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD≤

6、8.02％。結(jié)果表明，此法有較高的靈敏度、準(zhǔn)確度與精密性。
　　3、采用傳統(tǒng)進(jìn)樣方式，對(duì)不同基質(zhì)樣品的前處理方法進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，不同基質(zhì)的樣品前處理方法顯著不同。果汁、紅酒、香醋等樣品以超純水稀釋處理后再過(guò)0.45μm濾膜即可;乳制品及谷物飲料等樣品，需取1 mL置于10mL離心管中，加2mL正己烷飽和的乙腈和1 mL超純水，渦旋混勻，低溫離心20 min（5000 r/min，-15C）后，取清液500μL氮?dú)獯蹈?，超純?/p>

7、復(fù)溶后過(guò)0.45μm濾膜即可;對(duì)于飼料樣品，則需將其粉碎后稱取2.5 g于燒杯中，加入150 mL水，水浴加熱浸提10 min，冷卻后超純水定容至250 mL，先用濾紙粗濾，再將清液過(guò)0.45μm濾膜即可。
　　4、比較了在線富集離子色譜—質(zhì)譜法與傳統(tǒng)的高效液相色譜法對(duì)馬來(lái)酸的分離分析效果。結(jié)果表明，高效液相色譜法分析馬來(lái)酸的檢出限為1 mg/L，而在線富集離子色譜—質(zhì)譜法為0.01 mg/L。在線富集離子色譜—質(zhì)譜法采用200μ