影響微生物培養(yǎng)基質(zhì)量的關(guān)鍵因素研究.pdf

1、近年來(lái)國(guó)內(nèi)外食品微生物檢驗(yàn)與控制技術(shù)發(fā)展迅猛，高靈敏度、高特異性的微生物快速檢測(cè)方法和商品化產(chǎn)品越來(lái)越多地走進(jìn)食品微生物實(shí)驗(yàn)室。但是無(wú)論檢驗(yàn)技術(shù)如何發(fā)展，培養(yǎng)基仍然是技術(shù)的核心與關(guān)鍵所在。因此，培養(yǎng)基的質(zhì)量是微生物檢測(cè)工作的基礎(chǔ)，事關(guān)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性。培養(yǎng)基的制備和使用更是微生物檢測(cè)工作的重要環(huán)節(jié)。培養(yǎng)基自身質(zhì)量的優(yōu)劣、保存是否得當(dāng)、配制使用是否正確等都對(duì)微生物的生長(zhǎng)、分離、鑒定及檢驗(yàn)結(jié)果的正確與否起著至關(guān)重要的作用。由于微生物

2、培養(yǎng)基質(zhì)量穩(wěn)定性是由諸多因素造成的。只有了解了不同因素對(duì)微生物培養(yǎng)基質(zhì)量穩(wěn)定性所造成的影響，才能對(duì)微生物培養(yǎng)基進(jìn)行有效的監(jiān)控，從根本上保證微生物檢測(cè)結(jié)果的可信和有效。
　　本文首先通過(guò)對(duì)培養(yǎng)基配制過(guò)程中影響培養(yǎng)基 pH值穩(wěn)定性的因素進(jìn)行分析，了解了各因素對(duì)培養(yǎng)基pH值的影響。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，培養(yǎng)基 pH值的變化隨著測(cè)量時(shí)溫度的降低而升高。培養(yǎng)基中含胨量的高低與pH值變化的絕對(duì)值呈反比關(guān)系，而含糖量的高低與其呈正比關(guān)系。不同滅菌溫度

3、和滅菌前是否加入校準(zhǔn)試劑對(duì)培養(yǎng)基 pH變化平均值均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由此可見，測(cè)量 pH值時(shí)的溫度、培養(yǎng)基成分、滅菌溫度與時(shí)間、滅菌前是否加入校準(zhǔn)試劑等對(duì)培養(yǎng)基 pH值穩(wěn)定性均有不同程度的影響。
　　其次，在了解了各因素對(duì)培養(yǎng)基 pH值的影響之后，本研究對(duì)不同pH值的培養(yǎng)基在不同培養(yǎng)溫度下微生物檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了研究。研究采用最為常用的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基及革蘭氏陰性菌（沙門氏菌）和革蘭氏陽(yáng)性菌（金黃色葡萄球菌）各一株。發(fā)現(xiàn)金黃色葡萄球菌

4、和沙門氏菌在培養(yǎng)基pH值為6.5-7.0、培養(yǎng)溫度為36±1℃的范圍中檢出率最高。隨著培養(yǎng)基 pH值和培養(yǎng)溫度的升高或降低檢出率呈下降趨勢(shì)。培養(yǎng)基pH值為6.0-7.5及培養(yǎng)溫度為28±1℃和36±1℃時(shí)的檢測(cè)結(jié)果間均不存在顯著差異。就不同的微生物來(lái)說(shuō)，金黃色葡萄球菌較沙門氏菌對(duì)培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)pH值的變化更敏感。
　　再次，本研究就培養(yǎng)基經(jīng)加熱溶解不同次數(shù)后對(duì)微生物檢測(cè)結(jié)果的影響進(jìn)行了研究。選擇了較為常用的平板計(jì)數(shù)瓊脂和伊紅美藍(lán)瓊

5、脂作為供試培養(yǎng)基，選用金黃色葡萄球菌和大腸埃希氏菌進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，隨著培養(yǎng)基加熱溶解次數(shù)增加，培養(yǎng)基 pH值不斷下降。平板計(jì)數(shù)瓊脂在經(jīng)過(guò)反復(fù)凍融后 pH值下降幅度較伊紅美藍(lán)更大。由于培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的加熱過(guò)程中使得大量的水分揮發(fā)，蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)也被破壞或丟失，培養(yǎng)基 pH值不斷下降，使得微生物生長(zhǎng)繁殖受到了抑制甚至不能生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)了隨著培養(yǎng)基加熱溶解次數(shù)的增加微生物檢測(cè)結(jié)果偏差率呈上升趨勢(shì)。
　　最后，本研究經(jīng)不

6、同儲(chǔ)存溫度、時(shí)間及不同包裝方式對(duì)培養(yǎng)基在不同條件下儲(chǔ)存后對(duì)微生物檢測(cè)結(jié)果的影響進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)儲(chǔ)存5天內(nèi)的培養(yǎng)基對(duì)檢測(cè)結(jié)果并無(wú)顯著影響（P＞0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，以瓶裝方式儲(chǔ)存的培養(yǎng)基微生物檢測(cè)結(jié)果誤差最小且保存的時(shí)間能相對(duì)更久的實(shí)驗(yàn)結(jié)果充分說(shuō)明了控制水分及有效成份的揮發(fā)是適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)基保存期的關(guān)鍵所在。
　　本文研究顯示，微生物培養(yǎng)基的pH值、加熱溶解次數(shù)、不同的儲(chǔ)存條件對(duì)培養(yǎng)基的質(zhì)量都會(huì)造成不同程度的影響。并且各因素間