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1、36種微生物常用培養(yǎng)基配制種微生物常用培養(yǎng)基配制1.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(用于細(xì)菌培養(yǎng))牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl5g,水1000mL,pH7.4~7.6。2.高氏1號(hào)培養(yǎng)基(用于放線菌培養(yǎng))可溶性淀粉20g,KNO31g,NaCl0.5g,K2HPO4?3H2O0.5g,MgSO4?7H2O0.5g,F(xiàn)eSO4?7H2O0.01g,水1000mL,pH7.4~7.6。配制時(shí)注意:可溶性淀粉要先用冷水調(diào)勻后再加入到以上培養(yǎng)基中。3
2、.馬丁氏(Martin)培養(yǎng)基(用于從土壤中分離真菌)K2HPO41g,MgSO4?7H2O0.5g,蛋白胨5g,葡萄糖10g,13000孟加拉紅水溶液100mL,水900mL,自然pH,121℃濕熱滅菌30min。待培養(yǎng)基融化后冷卻55~60℃時(shí)加入鏈霉素(鏈霉素含量為30μgmL)。4.馬鈴薯培養(yǎng)基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培養(yǎng))馬鈴薯(去皮)200g,蔗糖(或葡萄糖)20g,水1000mL,配制方法如下:將馬鈴署去皮,切成約2c
3、m2的小塊,放入1500mL的燒杯中煮沸30min,注意用玻棒攪拌以防糊底,然后用雙層紗布過(guò)濾,取其濾液加糖,再補(bǔ)足至1000mL,自然pH,霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖。5.察氏培養(yǎng)基(蔗糖硝酸鈉培養(yǎng)基)(用于霉菌培養(yǎng))蔗糖30g,NaNO32g,K2HPO41g,MgSO4?7H2O0.5g,KCl0.5g,F(xiàn)eSO4?7H2O0.1g,水1000mL,pH7.0~7.2。6.Hayflik培養(yǎng)基(用于支原體培養(yǎng))牛心消化液(或浸出液
4、)1000mL,蛋白胨10g,NaCl5g,瓊脂15g,pH7.8~8.0,分裝每瓶70mL,121℃濕熱滅菌15min,待冷卻至80℃左右,每70mL中加入馬血清20mL,25%鮮酵母浸出液10mL,15醋酸鉈水溶液2.5mL,青霉素G鉀鹽水溶液(20萬(wàn)單位以上)0.5mL,以上混合后傾注平板。注意:醋酸鉈是極毒的藥品,需特別注意安全操作。7.麥?zhǔn)?McCLary)培養(yǎng)基(醋酸鈉培養(yǎng)基)葡萄糖0.1gKCl0.18g,酵母膏0.25g
5、,醋酸鈉0.82g,瓊脂l.5g,蒸餾水l00mL。溶解后分裝試管,1l5℃濕熱滅菌15min。8.葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基(用于V.P.反應(yīng)和甲基紅試驗(yàn))蛋白胨0.5g,葡萄糖0.5g,K2HPO40.2g,水100mL,pH7.2,1l5℃濕熱滅菌20min。9.蛋白胨水培養(yǎng)基(用于吲哚試驗(yàn))蛋白胨10g,NaCl5g,水1000mL,pH7.2~7.4,121℃濕熱滅菌20min。10.糖發(fā)酵培養(yǎng)基(用于細(xì)菌糖發(fā)酵試驗(yàn))蛋白胨0.2g
6、,NaCl0.5g,K2HPO40.02g,水100mL,溴麝香草酚藍(lán)(1%水溶液)0.3mL,糖類lg。分別稱取蛋白胨和NaCl溶于熱水中,調(diào)pH至7.4,再加入溴麝香草酚藍(lán)(先用少量95%后,加入無(wú)菌兔血清,制成8%血清溶液,然后分裝試管(5~10mL管),56℃水浴滅活lh后備用。20.豆芽汁培養(yǎng)基黃豆芽500g,加水1000mL,煮沸l(wèi)h,過(guò)濾后補(bǔ)足水分,121℃濕熱滅菌后存放備用,此即為50%的豆芽汁;用于細(xì)菌培養(yǎng):10%豆芽
7、汁200mL,葡萄糖(或蔗糖)50g,水800mL,pH7.2~7.4。用于霉菌或酵母菌培養(yǎng):10%豆芽汁200mL,糖50g,水800mL,自然pH。霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖。21.LB(Luria—Bertani)培養(yǎng)基(細(xì)菌培養(yǎng),常在分子生物學(xué)中應(yīng)用)雙蒸餾水950mL,胰蛋白胨l0g,NaCll0g,酵母提取物(bactoyeastextract)5g,用lmolLNaOH(約lmL)調(diào)節(jié)pH值至7.0,加雙蒸餾水至總體積為1
8、L,121℃濕熱滅菌30min。含氨芐青霉素LB培養(yǎng)基:待LB培養(yǎng)基滅菌后冷至50℃左右加入抗生素,至終濃度為80~100mgL。22.復(fù)紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基(遠(yuǎn)藤氏培養(yǎng)基)、(用于水體中大腸菌群測(cè)定)蛋白胨10g,牛肉浸膏5g,酵母浸膏5g,瓊脂20g,乳糖10g,K2HPO40.5g,無(wú)水亞硫酸鈉5g,5%堿性復(fù)紅乙醇溶液20mL,蒸餾水1000mL。制作過(guò)程:先將蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏和瓊脂加入到900mL水中,加熱溶解,再加入K
9、2PO4,溶解后補(bǔ)充水至l000mL,調(diào)pH至7.2~7.4。隨后加入乳糖,混勻溶解后,于115℃濕熱滅菌20min。再稱取亞硫酸鈉至一無(wú)菌空試管中,用少許無(wú)菌水使其溶解,在水浴中煮沸10min后,立即滴加于20mL5%堿性復(fù)紅乙醇溶液中,直至深紅色轉(zhuǎn)變?yōu)榈奂t色為止。將此混合液全部加入到上述已滅菌的并仍保持融化狀態(tài)的培養(yǎng)基中,混勻后立即倒平板,待凝固后存放冰箱備用,若顏色由淡紅變?yōu)樯罴t,則不能再用。23.乳糖蛋白胨半固體培養(yǎng)基(用于水
10、體中大腸菌群測(cè)定)蛋白胨10g,牛肉浸膏5g,酵母膏5g,乳糖10g,瓊脂5g,蒸餾水1000mL,pH7.2~7.4,分裝試管(l0mL管),115℃濕熱滅菌20min。24.乳糖蛋白胨培養(yǎng)液(用于多管發(fā)酵法檢測(cè)水體中大腸菌群)蛋白胨10g,牛肉膏3g,乳糖5g,NaCl5g,蒸餾水l000mL,1.6%溴甲酚紫乙醇溶液lmL。調(diào)pH至7.2,分裝試管(l0mL管),并放入倒置杜氏小管,l15℃濕熱滅菌20min。25.三倍濃乳糖蛋白
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