茚并吡唑類微管蛋白抑制劑的結(jié)構(gòu)修飾及活性測定.pdf

1、腫瘤是威脅人類健康的殺手之一，腫瘤細(xì)胞能夠快速的增殖，而細(xì)胞增殖依賴于微管的作用。微管由α微管蛋白和β微管蛋白構(gòu)成的異二聚體及微管輔助蛋白組成，具有聚合和解聚的動力學(xué)特性，在構(gòu)成細(xì)胞支架，維持細(xì)胞正常形態(tài)、有絲分裂、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及物質(zhì)輸送等過程中起著重要作用。因此，微管是抗腫瘤藥物研究中一個十分重要的靶點(diǎn)。
　　微管蛋白抑制劑通過與微管上的特定結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合發(fā)揮抗腫瘤作用。微管上有四個典型的結(jié)合位點(diǎn)，分別是紫杉醇結(jié)合位點(diǎn)、Laulima

2、lide結(jié)合位點(diǎn)、長春堿結(jié)合位點(diǎn)和秋水仙堿結(jié)合位點(diǎn)。結(jié)合于紫杉醇結(jié)合位點(diǎn)和Laulimalide結(jié)合位點(diǎn)的抑制劑能夠促進(jìn)微管蛋白聚合或者抑制已形成的微管解聚，屬于微管穩(wěn)定劑。結(jié)合于長春堿結(jié)合位點(diǎn)和秋水仙堿結(jié)合位點(diǎn)的抑制劑能夠抑制微管聚集，屬于微管去穩(wěn)定劑。
　　秋水仙堿結(jié)合位點(diǎn)抑制劑可以作為作抗有絲分裂劑及抗血管阻斷劑使用，具有合成簡單，結(jié)構(gòu)多樣，抗腫瘤譜廣，適合小分子抑制劑的研究等特點(diǎn)。近年來靶向秋水仙堿結(jié)合位點(diǎn)的抑制劑如CA-

3、4,ABT-751等，在臨床上取得了重大進(jìn)展。
　　在前期研究中，我們實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)了靶向微管蛋白秋水仙堿結(jié)合位點(diǎn)、具有良好體內(nèi)外抗腫瘤活性的茚并吡唑衍生物L(fēng)L-01和LL-02。與ABT-751相比，LL-01和LL-02在秋水仙堿結(jié)合位點(diǎn)的作用區(qū)域的Ⅰ區(qū)的占據(jù)的比較少，仍有結(jié)構(gòu)修飾的空間。另外，LL-01和LL-02的水溶性較差。因此，本研究以茚并吡唑?yàn)槟负?，通過在6,7位的結(jié)構(gòu)修飾，使其與Ⅰ區(qū)的結(jié)合更充分。同時，對占據(jù)Ⅲ區(qū)的芳環(huán)

4、進(jìn)行修飾，引入取代氨基，以期改善化合物的水溶性。
　　以5,6-二甲氧基-1-茚酮為原料，經(jīng)脫甲基，MOM選擇性保護(hù)5位酚羥基，威廉姆遜成醚反應(yīng)在6位引入丙基，制備茚酮衍生物J-2。以間氨基苯酚為原料，經(jīng)氨基乙酰化，羥基乙基化，去保護(hù)，與硫光氣反應(yīng)，制備間乙氧基苯基異硫氰酸酯(Y-6)。以對硝基苯胺或間硝基苯胺為原料，將氨基用Boc保護(hù)后進(jìn)行乙基化;將硝基還原后，與硫光氣反應(yīng)，制備胺基苯基異硫氰酸酯衍生物J-6及J-6-1。茚酮中

5、間體J-2經(jīng)鋰試劑或氫化鈉處理后，分別與異硫氰酸酯Y-6、J-6、J-6-1親核加成，再與甲基肼環(huán)合，制備茚并吡唑中間體（YT-3,J-7及J-7-1）。6位酚羥基脫保護(hù)后，與氯乙酸甲酯反應(yīng)，合成6-氧代茚并吡唑乙酸甲酯關(guān)鍵中間體(YT-6,J-9及J-9-1)。YT-6的6位甲酯通過與不同的胺反應(yīng)，制備了5個目標(biāo)化合物(YT-01-YT-05)。J-9的6位甲酯與不同的胺反應(yīng)，3位取代苯胺的乙胺基去Boc保護(hù)，制備了7個目標(biāo)化合物(J

6、YT-001,002,004,006,008,009,010)。J-9、J-9-1的3位取代苯胺芳環(huán)上的氨基去Boc，得中間體J-10，J-10-1。J-10，J-10-1的6位甲酯再與不同的胺反應(yīng)，制備了6個目標(biāo)化合物(JYT-003,JYT-005,JYT-1-1-JYT-4-1)。本研究共合成18個茚并吡唑衍生物。通過1HNMR，13CNMR，ESI-MS，元素分析等對化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)確證。
　　對18個化合物進(jìn)行了體外抗腫