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文檔簡介
1、本課題以廣西特色的熟六堡茶為原料,先提取分離后做小鼠實驗研究,再分離純化并測定活性成分,從而為六堡茶的深加工和產(chǎn)業(yè)化發(fā)展提供理論數(shù)據(jù)和技術(shù)支持,同時促進六堡茶功能性產(chǎn)品的開發(fā)。
(1)以廣西熟六堡茶為原料,先用70%的乙醇提取浸膏,再用溶劑系統(tǒng)分離法,即選用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水分步萃取六堡茶浸膏,共可得到5個不同劑相的提取物并用于后續(xù)研究。其中,乙醇浸提物的提取率為18.08%,石油醚萃取物0.21%,乙酸乙酯萃取
2、物0.64%,正丁醇萃取物1.63%,水相萃取物14.51%。結(jié)果表明,該提取方法簡易可行,提取的物質(zhì)中等極性以上的較多。
(2)建立小鼠的急性高脂血模型,造模同時連續(xù)灌胃六堡茶提取物,14天后高脂模型組與空白對照組比較,血脂水平明顯升高,造模成功;分別設(shè)定0.3和0.15(g·kg-1·bw-1·d-1)為大小劑量,與高脂模型組比較,篩選出對小鼠起降血脂作用的六堡茶提取物。其中0.3和0.15的水相萃取物,0.3的乙醇浸
3、提物以及0.3的乙酸乙酯萃取物均能明顯降低血清總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量,增加高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量;而正丁醇和石油醚萃取物對TC、TG降低不顯著,對HDL-C無明顯影響。結(jié)果表明,六堡茶乙醇浸提物、乙酸乙酯萃取物和水相萃取物具有降血脂效果,且效果增強。
(3)給小鼠灌胃3種六堡茶降血脂活性提取物10天。分別設(shè)定0.4和0.2(g·kg-1·bw-1·d-1)為大小劑量,與兩個對照組比較,確定六堡
4、茶的三大降血脂活性提取物對小鼠的抗凝血作用。其中0.4和0.2的乙酸乙酯萃取物,0.4和0.2的水相萃取物以及0.4的乙醇浸提物均能明顯延長血漿活化部分凝血活酶時間(APTT);0.4和0.2的乙醇浸提物,0.4和0.2的乙酸乙酯萃取物以及0.4的水相萃取物均能明顯延長血漿凝血酶時間(TT);0.4和0.2的乙酸乙酯萃取物,0.4的乙醇浸提物以及0.4的水相萃取物均能明顯延長血漿凝血酶原時間(PT)。結(jié)果表明,六堡茶的3大降血脂活性提取
5、物同樣具有抗凝血效果,且效果增強。
(4)以六堡茶乙酸乙酯萃取物為對象,經(jīng)層析色譜(TLC)分離純化后,共得到了5個極性段的物質(zhì);使用HPLC分析柱和通用程序進行梯度洗脫后,發(fā)現(xiàn)2’茶樣的色譜分離情況最好;換用半制備柱并將2’茶樣的洗脫程序進一步優(yōu)化,確定最適的色譜條件并制備純度較高的峰物質(zhì)。結(jié)果分離得到四個純度較高的峰;利用1H NMR譜和13C NMR分析這4個峰物質(zhì),結(jié)果分別判定為咖啡堿、沒食子酸、紫槲皮甙和槲皮素。
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