脂肪酶的化學修飾及其在帕羅醇拆分中的應用研究.pdf

1、脂肪酶(EC3.1.1.3)以其高選擇性、高穩(wěn)定性、反應條件溫和,不需要輔酶等優(yōu)良特性成為一種重要的工業(yè)用酶,廣泛應用于醫(yī)藥、化工、食品、飼料和能源等行業(yè)。帕羅醇是帕羅西汀的中間體,目前其拆分以化學法為主。但是近年來隨著人們對綠色化學品需求的增加,以酶作為催化劑來進行手性拆分越來越引起人們的重視。因此,本課題基于非水相酶學的相關原理,利用脂肪酶對其拆分。
　　(1)從7種不同來源的脂肪酶中篩選得到的CRL的催化效率最高。乙腈作為反

2、應介質的效果最好。通過對影響酶催化拆分帕羅醇的操作條件進行優(yōu)化,得到的最優(yōu)操作條件為:酶濃度10g/l,轉速100r/min,底物摩爾比5:1,反應溫度35℃和反應時間18h,在此條件下的底物轉化率為46.95％。
　　(2)分別應用丁二酸酐和鄰苯二甲酸酐對CRL脂肪酶進行了化學修飾,修飾后的酶的熱穩(wěn)定性比天然酶有明顯提高,修飾酶的酶活損失較小;耐有機溶劑性更強;紫外吸收光譜說明CRL確實發(fā)生了化學修飾,且導致酶分子結構發(fā)生一定的