白及止血作用、作用機(jī)制及止血效價(jià)測(cè)定研究.pdf

1、目的：通過(guò)白及組分的止血作用及作用機(jī)制研究，探討白及有效組分，并建立一種基于止血效價(jià)的生物活性測(cè)定方法。
　　方法:1.白及用95％乙醇回流提取浸膏，浸膏經(jīng)不同濃度乙醇大孔樹(shù)脂柱層析分離，分別獲得 A、B、C、D組分，剩余藥渣水煮、醇沉、Sevag法除蛋白，制備E組分；2.采用小鼠剪尾法對(duì)白及不同組分的止血作用及有效組分進(jìn)行篩選；3.建立大鼠肺、胃出血（BHH syndrome）模型，考察白及止血有效組分對(duì)大鼠一般體征、血小板系統(tǒng)

2、、纖溶系統(tǒng)、肺、胃組織病理學(xué)的影響，對(duì)白及止血作用機(jī)制進(jìn)行研究；4.通過(guò)Apyrase酶、P2Y1受體抑制劑（MRS2179）、P2Y12受體抑制劑（2-MeSAMP）、PKC受體抑制劑（Ro-31-8220）和TXA2受體抑制劑（SQ29548）觀察白及止血有效組分對(duì)大鼠體外血小板聚集、變形以及釋放的作用特點(diǎn)和G蛋白偶聯(lián)受體中ADP受體及TXA2信號(hào)通路的影響，探討白及體外的止血作用機(jī)制；5.采用凝血酶時(shí)間（TT）的生物活性測(cè)定方法，

3、對(duì)白及有效組分的止血效價(jià)進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　結(jié)果：1. C、E組分均能顯著縮短小鼠出血時(shí)間（P<0.001），其縮短率分別為36.3%、45.7%；2.與模型組比較C、E組分均能使血小板最大聚集率升高（P<0.05），t-PA與PAI-1的比值接近于1（P<0.05），改善肺、胃出血情況；3. Apyrase酶、MRS2179、2-MeSAMP和Ro-31-8220能夠特異性的抑制E組分對(duì)血小板的誘導(dǎo)作用，SQ29548對(duì)血小板聚集無(wú)

4、抑制作用；4.凝血酶時(shí)間（TT）的生物活性測(cè)定方法能通過(guò)可靠性檢驗(yàn)（偏離直線 P>0.05、偏離平行 P>0.05），儀器精密度（RSD3.84%）、中間精密度（RSD4.57%）、重復(fù)性（RSD3.21%）、穩(wěn)定性（RSD3.67%）良好，不同產(chǎn)地白及止血生物效價(jià)為821.93~1187.53 U·g-1。
　　結(jié)論：C、E組分為白及有效組分，白及有效組分能通過(guò)改善血小板系統(tǒng)、纖溶系統(tǒng)對(duì)肺、胃組織的出血發(fā)揮治療作用，并主要通過(guò)對(duì)