H2O2傳感器的構建及其檸檬醛抑制黃曲霉產毒機理研究中的應用.pdf

1、前期研究表明檸檬醛對黃曲霉產毒有著良好的抑制效果，但抑制機理仍不清楚。本實驗主要通過制備PDA-Fe3O4納米復合物，構建H2O2無酶傳感器，并利用此無酶傳感器實時監(jiān)測檸檬醛刺激黃曲霉胞外H2O2釋放的動態(tài)變化，研究檸檬醛抑制黃曲霉產毒的機理。為預防以及減少糧食中黃曲霉毒素的污染提供一定的理論基礎和技術支撐。主要結論如下:
　　1.通過原位共沉淀成功制備了PDA-Fe3O4納米復合物，此復合物上均勻分布著單晶體磁性納米顆粒，并且通

2、過FTIR發(fā)現(xiàn)PDA-Fe3O4納米復合物保持著PDA良好的親水性。
　　2.構建了一種新型的H2O2無酶電化學傳感器(PDA-Fe3O4-Nafion/GCE)。其檢測范圍為0.5-6.0μM，靈敏度為51.06μA/mM，檢測限為4.9×10-8M(S/N=3)，具有很好的選擇性，而且能成功檢測黃曲霉胞外釋放的H2O2。
　　3.利用HPLC檢測不同培養(yǎng)時間和不同處理條件下黃曲霉毒素的含量，發(fā)現(xiàn)檸檬醛對黃曲霉短時間作用和

3、長時間作用都能抑制其產毒。
　　4.通過PDA-Fe3O4-Nafion/GCE實時監(jiān)測黃曲霉胞外釋放H2O2，熒光檢測相應時間胞內ROS水平，以及對黃曲霉形態(tài)、抗氧化酶活性、胞內大分子（脂質和蛋白質）等的變化的測定，發(fā)現(xiàn)檸檬醛抑制黃曲霉產毒與ROS密切相關。且抑制機理可以分為短時間效應和長時間效應兩種形式。檸檬醛短時間作用黃曲霉能刺激其胞內ROS大量向胞外釋放，使胞內ROS達不到毒素產生所需的水平，從而抑制其產毒;而檸檬醛長時間