豆類胰蛋白酶抑制劑的提取分離及純化.pdf

1、植物胰蛋白酶抑制劑是一種能抑制胰蛋白酶活性的蛋白類物質(zhì),在豆類植物中分布廣泛。它們不僅能使植物產(chǎn)生抗蟲性,還具有抗腫瘤、抗輻射等多種重要的生理功能,是當(dāng)下研究的熱門話題。我國擁有豐富的豆類資源,但對豆類胰蛋白酶抑制劑的研究主要集中于大豆、綠豆等少數(shù)幾種豆類,急需對其他種屬豆類種籽的胰蛋白酶抑制劑進行廣泛的篩查。本文選取了15種不同種屬和產(chǎn)地的豆類,測定其胰蛋白酶抑制劑活性;并選取了4種菜豆類種籽,測定了胰蛋白酶抑制劑在種籽不同部位的分布

2、情況;對胰蛋白酶抑制劑進行分離純化,得到胰蛋白酶抑制劑純品,并測定了其熱穩(wěn)定性。
　　本文首先測定了15種不同種屬和產(chǎn)地豆類種籽中胰蛋白酶抑制劑的活性,并選取4個樣本,探討了胰蛋白酶抑制劑在種籽不同部位的分布。研究發(fā)現(xiàn),種屬和產(chǎn)地對胰蛋白酶抑制劑的活性均有一定的影響,以大豆屬的抑制劑活性最高,其次為菜豆屬,再其次為豇豆屬。胰蛋白酶抑制劑主要分布在種籽的子葉中,但種胚的比活力均高于子葉。
　　此外,本文依次采用硫酸銨分級沉淀、

3、DEAE-52陰離子交換層析和Sephadex G-100凝膠過濾層析對4種菜豆類種籽胰蛋白酶抑制劑進行分離純化。實驗分別得到分子量約為24.3kDa的小黑蕓豆胰蛋白酶抑制劑;分子量為15.6kDa的奶花蕓豆胰蛋白酶抑制劑;分子量為11.4kDa和16.7kDa的奶白花蕓豆胰蛋白酶抑制劑;以及分子量為10.6kDa,17.8kDa和52.0kDa的大白蕓豆胰蛋白酶抑制劑組分。對4種菜豆胰蛋白酶抑制劑熱穩(wěn)定性的研究表明,四者均具有一定的熱

4、穩(wěn)定性,100℃處理60min后,奶花蕓豆、奶白花蕓豆、大白蕓豆和小黑蕓豆胰蛋白酶抑制劑的活力分別保持了66.44％,57.81%,50.59%和44.76%。
　　胰蛋白酶抑制劑雖然在豆科植物中分布廣泛、種類繁多,但其研究多集中于大豆、綠豆、豇豆等少數(shù)幾種豆類種籽。近年來有學(xué)者開始將研究對象轉(zhuǎn)移到蕓豆、飯豆等其他豆科植物上,但其研究多止步于分離純化及初步的理化性質(zhì)研究。相信多種豆類種籽中胰蛋白酶抑制劑的深入研究將成為新的研究熱點