泥螺糖胺聚糖的提取、純化與功能活性研究.pdf

1、糖胺聚糖(Glycosaminoglycans，GAGs)是由不同的重復二糖單元組成的線性多糖，具有多種功能活性，如抗凝血、抗腫瘤、降血脂等。研究表明，海洋生物中含有豐富的糖胺聚糖。泥螺是一種具有研究開發(fā)潛力的海洋生物，對其進行藥學研究和保健品開發(fā)可以充分利用我國豐富的海洋生物資源，為泥螺的高值化開發(fā)利用提供理論依據(jù)，為新型藥物先導化合物的開發(fā)探索一條新途徑，具有重要的理論和實踐意義。本研究的主要內(nèi)容如下:
　　在單因素試驗的基礎

2、上，利用Design expert 7.0軟件和響應面分析相結合的方法優(yōu)化泥螺糖胺聚糖提取工藝。建立了二次多項式回歸模型，該模型能較好的反映各因素與響應值之間的關系，確定泥螺糖胺聚糖的最佳提取工藝條件為液料比2∶1，酶解時間7.5h，酶添加量0.80％，在此條件下，泥螺糖胺聚糖的提取率可達0.265％。
　　采用吸附法、超濾法和等電點沉淀法對糖胺聚糖粗品進行一次純化，以除去蛋白質、色素和無機鹽等雜質，得GAG-1，回收率47.75

3、％，糖胺聚糖含量由21.50％提高到65.20％;采用CTAB（十六烷基三甲基溴化銨）絡合法進行二次純化得GAG-2，回收率為62.14％，糖胺聚糖含量由65.20％提高到90.82％。
　　對純化后的糖胺聚糖進行紫外光譜掃描和瓊脂糖凝膠電泳。紫外光譜掃描結果顯示，純化后的糖胺聚糖在260nm和280nm附近沒有明顯的吸收峰，說明純化后的樣品中蛋白質和核酸含量很低，雜質基本被除去;瓊脂糖凝膠電泳顯示，與標準品相比，泥螺糖胺聚糖圖譜

4、斑點有明顯的拖尾，表明泥螺糖胺聚糖中糖胺聚糖種類不均一或分子量分散性較大。
　　采用明膠-BaCl2法、咔唑比色法和Ehrlich法測定純化的糖胺聚糖的化學組成，結果顯示，泥螺糖胺聚糖中硫酸根含量為3.95％，糖醛酸含量為25.83％，氨基糖含量為14.19％。
　　KBr壓片法進行了泥螺糖胺聚糖的紅外吸收光譜分析，顯示泥螺糖胺聚糖中含有-OH(3400cm-1)、-COO-(1639cm-1)、-SO2(1421cm-1)