僵蠶抗凝活性成分的提取與純化.pdf

1、我們對(duì)傳統(tǒng)中藥僵蠶的研究發(fā)現(xiàn)其粗提液在體內(nèi)外有很強(qiáng)的抗凝血作用.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,它不僅對(duì)凝血酶原時(shí)間(PT),白陶土部分凝血活酶時(shí)間(APTF)具有延長(zhǎng)作用,而且對(duì)凝血酶時(shí)間(TT)也有顯著延長(zhǎng)作用,表明是直接抑制凝血酶-纖維蛋白原反應(yīng)物<'[1]>.為了提取和分離純化僵蠶抗凝活性蛋白成分,闡明僵蠶抗凝的化學(xué)本質(zhì),該文首先對(duì)僵蠶粗提物的提取次數(shù),提取時(shí)間,溶媒用量及浸泡時(shí)間進(jìn)行考察,以紫外分光光度法測(cè)定其抗凝蛋白含量,用L<,9>(3<'

2、4>)正交設(shè)計(jì)得出最佳提取工藝為:僵蠶用8倍量水煎煮2次,每次30分鐘.然后將僵蠶粗提液用凝膠色譜和離子交換色譜進(jìn)行分離純化,結(jié)果顯示:凝膠色譜分離得到4個(gè)色譜峰,其中峰3活性與其它組分相比有顯著差異(P<0.01),活性組分進(jìn)一步用陰離子色譜交換梯度洗脫,得到3個(gè)色譜峰,其中峰1活性與其它組分相比有顯著差異(P<0.01),將其脫鹽后再用陽離子色譜分離得到單一活性組分.對(duì)陽離子色譜分離的抗凝活性多肽進(jìn)行純度和結(jié)構(gòu)鑒定表明:聚丙烯酰胺凝