外源性糖皮質(zhì)激素對電化學(xué)發(fā)光免疫分析法皮質(zhì)醇檢測的干擾.pdf

1、背景與目的：
　　 糖皮質(zhì)激素既是一種機體合成和分泌的重要內(nèi)分泌激素，又是一種應(yīng)用廣泛的臨床藥物。內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素是一種類固醇激素，由腎上腺皮質(zhì)合成及分泌。皮質(zhì)醇又名氫化可的松，是人體最主要的糖皮質(zhì)激素。皮質(zhì)醇對機體的心血管、代謝及免疫系統(tǒng)等均有支持及調(diào)節(jié)作用，糖皮質(zhì)激素參與免疫活化的反饋調(diào)節(jié)，可抑制過度炎癥反應(yīng)。因此在臨床上常用來治療由免疫系統(tǒng)過度活躍所造成的疾病。此外，也常用于應(yīng)激狀態(tài)的改善以及激素缺乏時的補充或替代治療。<

2、br>　　 下丘腦—垂體—腎上腺皮質(zhì)軸為機體皮質(zhì)醇合成和分泌的調(diào)節(jié)系統(tǒng)。體內(nèi)皮質(zhì)醇水平檢測對于下丘腦—垂體—腎上腺軸功能的評價有重要意義，因此，檢測方法是否能真實地反映機體內(nèi)源性皮質(zhì)醇水平。
　　 臨床上所用的糖皮質(zhì)激素主要為人工合成糖皮質(zhì)激素，即外源性糖皮質(zhì)激素。各種人工合成的皮質(zhì)激素的結(jié)構(gòu)和功能與皮質(zhì)醇極為相似，因此外源性糖皮質(zhì)激素可能對電化學(xué)發(fā)光免疫分析法皮質(zhì)醇檢測造成干擾。目前，電化學(xué)發(fā)光免疫分析法作為較先進的檢測方法

3、已被廣泛應(yīng)用于皮質(zhì)醇水平檢測，但是，并沒有文獻介紹這種方法在皮質(zhì)醇水平檢測方面的抗干擾能力。
　　 本課題用可的松、潑尼松、潑尼松龍、甲潑尼松龍、地塞米松和倍他米松等六種臨床常用的外源性糖皮質(zhì)激素作為內(nèi)源性皮質(zhì)醇的干擾物，檢測干擾物影響下的血清皮質(zhì)醇水平，對六種外源性糖皮質(zhì)激素進行干擾篩查以鑒別何種外源糖皮質(zhì)激素可作為干擾物對電化學(xué)發(fā)光免疫分析法皮質(zhì)醇檢測產(chǎn)生干擾，及干擾劑量相關(guān)性分析以研究干擾物的劑量與效應(yīng)關(guān)系，為將來臨床皮質(zhì)

4、醇檢測數(shù)據(jù)的判斷提供參考。
　　 方法：
　　 1、干擾物溶液配制
　　 以無水乙醇為溶劑，分別將可的松、潑尼松、潑尼松龍、甲潑尼松龍、地塞米松及倍他米松等6種標(biāo)準(zhǔn)品配制成濃度為500mg/L的6種干擾物溶液。
　　 2、干擾篩查
　　 取方法1中配制好的六種干擾物溶液各10μL，分別加入500μL的血清中，配制成六種終濃度為10mg/L(1000μg/dL)的干擾物的溶液，作為實驗組;取同等體積

5、(10μL)的無水乙醇，加入500μL血清中，作為對照組。用全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀進行皮質(zhì)醇濃度檢測，記錄檢測結(jié)果。
　　 3、劑量相關(guān)性分析
　　 將未用的剩余血清均勻混合，形成混合血清。將方法1中配制的六種干擾物溶液用無水乙醇稀釋成不同濃度等級，加入混合血清中，分別配制成濃度為0、0.05(5)、0.1(10)、0.2(20)、0.5(50)、1.0(100)、2.0(200)、5.0(500)mg/L(μg/d

6、L)的六種含有干擾物的血清，重復(fù)檢測皮質(zhì)醇濃度，記錄檢測結(jié)果。
　　 4、統(tǒng)計分析
　　 采用SPSS17.0軟件進行方差分析、配對t檢驗、簡單回歸等方法分析，以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 1、干擾篩查
　　 經(jīng)電化學(xué)發(fā)光免疫法進行皮質(zhì)醇檢測，可的松，潑尼松，潑尼松龍及甲潑尼松龍四個實驗組皮質(zhì)醇檢測結(jié)果均高于檢測上限即大于60μg/dL，明顯高于對照組結(jié)果。地塞米松及倍他米松兩實

7、驗組皮質(zhì)醇檢測值均高于對照組，且經(jīng)配對T檢驗，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（地塞米松組:P=0.001，倍他米松組:P=0.006）。
　　 2、劑量相關(guān)性分析
　　 檢測結(jié)果通過簡單回歸分析得出六種干擾物劑量與干擾程度關(guān)系:六種干擾物均可對皮質(zhì)醇檢測產(chǎn)生干擾效應(yīng)，且隨干擾物劑量增加，皮質(zhì)醇檢測值增加;而加入小劑量的干擾物（潑尼松:c≦20μg/dL，甲潑尼松龍:c≦10μg/dL，地塞米松:c≦200μg/dL，倍他米松:c≦50

8、μg/dL）可對皮質(zhì)醇產(chǎn)生負(fù)性干擾，而使皮質(zhì)醇檢測值小于真實值?？傻乃?、潑尼松、潑尼松龍、甲潑尼松龍、地塞米松及倍他米松六種干擾物的劑量與皮質(zhì)醇檢測值的回歸關(guān)系表達式分別為:y=21.416+0.098x、y=17.056+0.018x、y=19.731+0.425x、y=19.086+0.52x、y=16.978+0.08x、y=17.104+0.55lnx。
　　 結(jié)論：
　　 可的松、潑尼松龍、潑尼松、甲潑尼松龍、