巨噬細胞移動抑制因子對糖皮質激素釋放及糖皮質激素受體功能的影響.pdf

1、第一部分、巨噬細胞移動抑制因子對正常大鼠皮質激素釋放和糖皮質激素受體功能的影響 目的：觀察外源性給予鼠重組巨噬細胞移動抑制因子（rMIF）對糖皮質激素（GC）釋放和糖皮質激素受體（GR）功能的影響。 方法：32只SD大鼠250-300g，隨機分為4組，每組8只：對照組（C組，生理鹽水1ml）；MIF低劑量組（MIF-L組，rMIF50ng）、中劑量組（MIF-M組，100ng）和高劑量組（MIF-H組，200ng）。靜脈

2、注射rMIF后持續(xù)觀察大鼠血壓和心率6h，并于注射前，注射后5min，3，6，12，24h分別取血檢測血漿皮質酮濃度。原代培養(yǎng)乳鼠心肌細胞，給予rMIF10、20ng/ml孵育后分別測GR和HSP90蛋白的表達。 結果：外源性給予rMIF后各組大鼠血壓和心率均無明顯變化，注射rMIF后三組血漿皮質酮濃度分別升高到197％（MIF-L組），200％（MIF-M組），248％（MIF-H組），與對照組92％比有顯著統(tǒng)計學意義差異（n

3、=8，P<0.05）。與對照組相比，分別使用10、20ng/ml rMIF孵育3h后心肌細胞GR蛋白表達沒有明顯變化，但糖皮質激素受體附件蛋白HSP90的表達分別減少到62％（10ng／ml組）和64％（20ng/ml組）。 結論：對健康大鼠模擬注入膿毒癥血漿近似濃度的MIF對循環(huán)機能沒有明顯影響，但促進大鼠GC釋放，提示MIF對心血管機能的增惡作用依賴于原發(fā)病理狀態(tài)。外源性投入MIF不影響心肌細胞GR蛋白表達，但減少GR附件蛋

4、白HSP90表達數(shù)量，可能是膿毒癥GR機能減低的原因之一。 第二部分、巨噬細胞移動抑制因子對糖皮質激素受體結合活力的影響及其可能機制 目的：觀察外源性給予鼠重組巨噬細胞移動抑制因子（rMIF）對糖皮質激素和受體結合力的影響，并探究其可能的機制。 方法：32只SD大鼠250-300g，隨機分為4組，每組8只：對照組（C組，生理鹽水1ml）；MIF低劑量組（MIF-L組，rMIF50ng）、中劑量組（MIF-M組，1

5、00ng）和高劑量組（MIF-H組，200ng）。于注射前，注射后5min，3，6，12，24h分別取血檢測血漿一氧化氮（nitric oxide，NO）含量（亞硝酸鹽NO2-和硝酸鹽NO3-總量）。原代培養(yǎng)大鼠肝細胞，分3組進行試驗：對照組，僅給予[3H]-地塞米松（[3H]—Dex）5-45nM；MIF組，rMIF20ng／ml孵育3h后加入[3H]—Dex5-45nM；MIF-L-NAME（NG-Nitro—L—arginine

6、Methyl Ester，NOS抑制劑）組，加[3H]-Dex前用L-NAME100μM與rMIF一起孵育3h。以上三組分別進行放免計數(shù)檢測。 結果：注射rMIF后三組血漿24小時平均NO含量分別為給藥前的104％（MIF-L組），99％（MIF—M組），102％（MIF—H組），與對照組98％比沒有統(tǒng)計學差異。與對照組相比，rMIF組、rMIF與L-NAME組肝細胞GR結合[3H]-Dex活力明顯降低，激素結合位點分別降低了4