一種用于快速檢測(cè)己烯雌酚的基于硝酸纖維素膜的電化學(xué)免疫傳感器.pdf

1、己烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)是一種人工合成的雌激素,自1938年起在世界范圍內(nèi)得到了廣泛應(yīng)用,包括在畜牧業(yè)和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中作為促生物劑來(lái)提高飼料的轉(zhuǎn)化率,以及在動(dòng)物醫(yī)學(xué)中用作雌激素替代品。但由于其致癌性和細(xì)胞毒性,從20世紀(jì)80年代起大多國(guó)家已明令禁用DES。過(guò)去20年來(lái)所報(bào)道的檢測(cè)動(dòng)物組織、器官、尿液中所含DES的各種技術(shù)包括氣相色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、二極管矩陣-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、化學(xué)發(fā)

2、光法、薄層層析法、酶聯(lián)免疫吸附法、熒光分析法、放射免疫法、放射性受體測(cè)定法及電化學(xué)免疫分析法等。DES的性質(zhì)穩(wěn)定且沸點(diǎn)高,因而用氣相色譜法檢測(cè)須經(jīng)衍生化。高效液相色譜法檢測(cè)效果較佳,但該法需要相對(duì)復(fù)雜的樣品提取、濃縮和清洗過(guò)程,且所需儀器復(fù)雜。較之放射免疫法和熒光分析法,酶聯(lián)免疫吸附法具有安全、快速、可靠、靈敏以及低成本等優(yōu)點(diǎn)。
　　 電化學(xué)免疫傳感器,因其兼具傳統(tǒng)免疫分析法的高特異性以及電化學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)的低檢測(cè)限和低成本的優(yōu)勢(shì),

3、即快速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、易攜帶且成本低,近年來(lái)愈來(lái)愈受關(guān)注。許多研究者們已應(yīng)用此法來(lái)檢測(cè)各種具有高特異性和高靈敏性的分析物。制備免疫傳感器的關(guān)鍵是免疫活性物在電極表面的固定:固定于電極表面膜中的生物大分子必須能展現(xiàn)其特異的免疫活性,保持其天然結(jié)構(gòu)并具有優(yōu)異的穩(wěn)定性?；谶@些原因,各種不同的膜,包括導(dǎo)電聚合物、鈦溶膠一凝膠及自組裝膜等都已被研究用來(lái)固定免疫分子來(lái)完成其免疫反應(yīng)。其中,鑄制薄膜由于其簡(jiǎn)易性、多能性及生物相容性得以廣泛應(yīng)用,例如納

4、米金和瓊脂糖膜。但這些膜制作繁瑣且較脆易碎。本實(shí)驗(yàn)采用硝酸纖維素膜,一種具有高的機(jī)械強(qiáng)度且易購(gòu)買的蛋白印跡的理想用膜,來(lái)作為制備電化學(xué)免疫傳感器的一種新型的固定基質(zhì)。
　　 本論文提出了一種新型的、簡(jiǎn)單的、免標(biāo)記的電化學(xué)免疫傳感器,用來(lái)快速檢測(cè)DES。主要是通過(guò)將己烯雌酚-牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)完全抗原吸附入修飾在金電極表面的硝酸纖維素膜上而構(gòu)建成的。利用電化學(xué)技術(shù)中的循環(huán)伏安法和差分脈