氨基酸添加和響應面優(yōu)化促利迪鏈霉菌抗真菌物產生研究.pdf

1、為提高利迪鏈霉菌的抗真菌活性,本文以利迪鏈霉菌E9為出發(fā)菌株,主要采用紫外誘變、氨基酸添加和響應面法優(yōu)化培養(yǎng)基三種方法來研究提高利迪鏈霉菌的抗真菌活性。
　　在E9發(fā)酵過程中添加不同濃度的異亮氨酸、纈氨酸、谷氨酸和脯氨酸,發(fā)現100mg/L濃度的脯氨酸添加能夠使E9的抗真菌活性提高7.95％,谷基酸、纈氨酸和異亮氨酸的外源添加抑制E9抗真菌活性物質的合成。同時,發(fā)現谷氨酸、脯氨酸的添加能夠使一種RNA酶抑制劑利迪鏈菌素的產量提高7

2、3.33%、32.75%,并推導出脯氨酸在微生物體內合成利迪鏈菌素的途徑。而纈氨酸和異亮氨酸的添加卻抑制利迪鏈菌素的合成。
　　在菌株E9的基礎上,為了獲得具有更高抗真菌活性的菌株,通過紫外誘變、菌絲塊法篩選獲得了一株能夠穩(wěn)定遺傳的高效菌株E12,其發(fā)酵液的抗真菌活性比E9高8.78%。此外,菌株E12對多種真菌也有明顯抑制作用。
　　利用響應面法對菌株E12的發(fā)酵培養(yǎng)基進行優(yōu)化。通過單因子實驗方法確定與抗真菌活性相關的重要

3、培養(yǎng)基成分因子淀粉、黃豆餅粉、K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O及各成分因子的最佳濃度;基于BBD試驗優(yōu)化設計、Design-Expert.V8.0.6.1軟件分析建立了各成分因子的二次多項式模型,確定抗真菌活性達到最高時的優(yōu)化培養(yǎng)基組成:84.96g/L淀粉、4.13g/L黃豆餅粉、2.14g/LK2HPO4·3H2O、1.23g/LMgSO4·7H2O、5g/L葡萄糖和0.5g/LNaCl。在此條件下對實驗結果進行驗證,得