一株海洋噬菌體與一株分離于病毒濃縮液的海洋細(xì)菌的分離與鑒定.pdf

1、海洋浮游病毒是海洋生態(tài)系統(tǒng)中豐度最高，多樣性極為豐富，生物量僅次于原核生物的有機體.由于對宿主的侵染和裂解作用，海洋浮游病毒影響和調(diào)節(jié)著微生物的群落結(jié)構(gòu)和生物地球化學(xué)特征以及海洋生態(tài)系統(tǒng)中的物質(zhì)和能量的流動.
　　 為從個體水平上了解海洋浮游病毒及其與宿主的相互作用，本研究一方面從海洋噬菌體的分離入手，在中國東海海域分離得到一株侵染海洋副球菌的噬菌體PMJL(φ)1，并在此基礎(chǔ)上，從生理與基因水平上對該病毒進行了研究和描述;另一

2、方面，在取于同一站位的在4℃中存放一年之久的海洋病毒濃縮液分離得到一株海洋細(xì)菌JLT2000.由于其獨特的分離得到途徑，研究其長久的耐寒及抗病毒機制有很大的意義.另外，由于其與已鑒定菌株較低的相似性，我們首先對其作了細(xì)菌學(xué)鑒定.本文的研究結(jié)果如下:
　　 (1)在中國東海海域分離得到的噬菌體PMJL(φ)1從形態(tài)上看屬于長尾噬菌體，有一個直徑約50 nm的等軸的頭部，長約122 nm，寬約10 nm的可彎曲，不可收縮的尾部.侵染

3、宿主JL65的潛伏期及裂解量分別約為30 min和27.對氯仿的敏感度具有濃度依賴性.此外，PMJL(φ)1為雙鏈DNA病毒，基因組為環(huán)狀，總長度為42，093 bp，G+C含量為56.37％.在該病毒基因組中預(yù)測得到53個ORF,其中大約55％的基因是未知的.有推測功能的基因包括DNA復(fù)制相關(guān)的基因，編碼結(jié)構(gòu)蛋白相關(guān)的基因及其它參與到DNA代謝，氨基酸代謝，轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)等過程的基因.另外值得注意的是在病毒的基因組中存在4個與GTA類似的基

4、因.PMJL(φ)1的53個ORF中有22個與一株分離于假單胞菌的噬菌體PA73有最高及較高的相似性，8個ORF與本實驗室一株分離鑒定并全基因組測序的海洋細(xì)菌Citromicrobium sp.JLT1363有著最高及較高的相似性.
　　 (2) JLT2000為一株革蘭氏陰性菌，嚴(yán)格好氧，化能異養(yǎng)，氧化酶，接觸酶陽性.菌體形態(tài)為擬桿狀，具有運動性，可以在6-9的pH值范圍內(nèi)，4-40℃的溫度范圍內(nèi)，0-12％的鹽度范圍內(nèi)生長.

5、它可以利用D-半乳糖，甘露醇，海藻糖，二水D-葡萄糖酸鈉，丙酮酸鈉，α-乳糖，纖維二糖，山梨醇，肌醇，L-谷氨酸鈉，葡萄糖等單碳源;并且可以利用甘露醇，葡萄糖，蔗糖，乳糖，纖維二糖，海藻糖，肌醇，D-半乳糖等糖醇類產(chǎn)酸.可以水解七葉苷，淀粉，幾丁質(zhì)，酪素，不能水解瓊脂，纖維素，明膠，尿素，DNA.脂肪酸的主要組分有iso-C15:0，iso-C15:03-OH，iso-C17:03-OH，Sum In Feature3(16∶1 w7c