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1、蛋白質(zhì)等天然大分子來(lái)源廣泛且安全性高,是構(gòu)建綠色、安全的營(yíng)養(yǎng)素納米載體的良好材料。蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)附近溶解性較差,因此以其作為載體材料時(shí)應(yīng)用范圍受到一定程度的限制。本文以酪蛋白與葡聚糖的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物作為基質(zhì),以輔酶Q10(CoQ10)作為代表性的營(yíng)養(yǎng)素,采用乙醇注入-超高壓均質(zhì)法制得酪蛋白-葡聚糖復(fù)合物/輔酶Q10)納米膠束(簡(jiǎn)稱復(fù)合物膠束),建立了復(fù)合物膠束中CoQ10總量的分析方法;確立了美拉德反應(yīng)時(shí)間與復(fù)合物膠束包埋性質(zhì)、穩(wěn)定性的
2、關(guān)系;采用冷凍干燥法制得前體膠束,旨在改善產(chǎn)品的運(yùn)輸性能、拓寬其應(yīng)用范圍。
首先,基于十二烷基硫酸鈉(SDS)對(duì)蛋白質(zhì)的增溶作用,確立了一種分析復(fù)合物膠束中CoQ10總量的方法。當(dāng)SDS濃度為0.31 mol/L、孵育溫度30℃、硼氫化鈉(7 mg/mL)用量100μL、還原時(shí)間3~5 min時(shí),SDS增溶法加樣回收率在(98.77±1.60)%~(95.90±0.80)%之間。同時(shí)復(fù)合物中酪蛋白單元的內(nèi)源熒光和外源芘熒光
3、光譜分析顯示,當(dāng)SDS濃度為0~0.5 mol/L時(shí),SDS通過(guò)部分改變酪蛋白單元的疏水結(jié)構(gòu)達(dá)到快速增溶的效果,從而使CoQ10充分釋放,以便定量分析。
探索了美拉德反應(yīng)時(shí)間與所形成復(fù)合物制得的膠束包埋性質(zhì)及穩(wěn)定性之間的關(guān)系。隨著美拉德反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng),復(fù)合物膠束的平均粒徑在190~210 nm之間變化,表觀形態(tài)呈球形或橢球形。以美拉德反應(yīng)時(shí)間較長(zhǎng)(20~24 h)的復(fù)合物獲得的膠束在儲(chǔ)藏期間平均粒徑變化較小、保留率較高。外源
4、芘熒光光譜分析表明,復(fù)合物膠束中營(yíng)養(yǎng)素的穩(wěn)定性與膠束疏水區(qū)范圍有關(guān)。復(fù)合物膠束在pH1~8范圍內(nèi)具有良好的pH耐受性。Zeta-電位與接枝度分析顯示,膠柬之間的靜電排斥作用并非維持其穩(wěn)定的主要因素,而是與膠束表面親水性葡聚糖的空間位阻效應(yīng)有關(guān)。
采用冷凍干燥法制得前體膠束,在儲(chǔ)藏過(guò)程中保持較高穩(wěn)定性。X-射線衍射以及差示掃描量熱技術(shù)分析表明前體膠束中CoQ10以無(wú)定形存在,因而儲(chǔ)藏穩(wěn)定好。復(fù)水后所得的膠束形態(tài)與原膠束基本相
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