基于PDMAEMA兩親性聚合物的基因-藥物納米載體結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)與體外評(píng)價(jià).pdf

1、高分子豐富的結(jié)構(gòu)和納米粒自組裝方法的多樣性，為功能性基因/藥物遞送載體的設(shè)計(jì)提供了很大的空間。本課題著眼于遞送系統(tǒng)的安全性和高效性兩個(gè)重要性能，以聚甲基丙烯酸二甲氨基乙酯為基礎(chǔ)，采用功能修飾、多元組裝等手段，實(shí)現(xiàn)載體生物相容性和轉(zhuǎn)染效率或藥物療效的同步提高。
　　首先，為了在提高轉(zhuǎn)染效率的同時(shí)依舊保持良好生物相容性，本文合成了磺胺嘧啶修飾的兩親性陽離子聚合物：聚己內(nèi)酯-接枝-聚(甲基丙烯酸二甲氨基乙酯-共聚-磺胺嘧啶)聚合物(PC

2、L-g-P(DMAEMA-co-SDZ)，PC-SDZ)，且PC-SDZ能夠在水中自組裝成陽離子型聚合物納米粒。研究了磺胺嘧啶功能化修飾對(duì)陽離子型聚合物自身親疏水性的影響，對(duì)PC-SDZ納米粒的粒徑、電位和質(zhì)子緩沖能力的影響，體外評(píng)價(jià)了PC-SDZ NPs/DNA納米復(fù)合物的轉(zhuǎn)染效率、細(xì)胞攝取、細(xì)胞內(nèi)分布及細(xì)胞毒性。結(jié)果表明，磺胺嘧啶修飾后的短鏈陽離子載體具有更低的表面電荷，因而細(xì)胞毒性相對(duì)較低；具有更致密的殼層結(jié)構(gòu)、更強(qiáng)的質(zhì)子緩沖能力

3、、增強(qiáng)的疏水性，最終導(dǎo)致了PC-SDZ NPs/DNA復(fù)合物更好的轉(zhuǎn)染效率。
　　課題組前期研究工作表明PCL-g-PDMAEMA納米粒具有較高的核酸遞送功效，但對(duì)抗腫瘤化藥的負(fù)載能力低，為了提高遞送系統(tǒng)基因/藥物共負(fù)載功能性。本文通過腙鍵把阿霉素(DOX)鍵合在PDMAEMA側(cè)鏈上，制備了PCL-g-P(DMA EMA-co-HEMA)-hyd-DOX(PCD)及其納米粒，組裝成PCD NPs/DNA納米粒，并把聚陰子透明質(zhì)酸-

4、接枝-聚乙二醇(HA-g-mPEG，HgP)組裝到PCD NPs/DNA二元復(fù)合物表面，自組裝形成NPs/DNA/HgP三元納米復(fù)合物。本文研究采用馬爾文激光粒度儀、透射電鏡等設(shè)備表征納米粒的粒徑、電位和表面形貌，采用CCK8法、綠色熒光蛋白表達(dá)等手段評(píng)價(jià)復(fù)合物的生物相容性和轉(zhuǎn)染效率，采用激光共聚焦技術(shù)、流式細(xì)胞技術(shù)、蛋白印跡等技術(shù)評(píng)價(jià)了載體在細(xì)胞水平上的共遞送過程和效果。結(jié)果表明，相對(duì)于PCNPs/DNA二元復(fù)合物，PC NPs/DN