表面與內(nèi)核的組成結(jié)構(gòu)對PDMAEMA基兩親性共聚物納米粒基因遞送功效的影響.pdf

1、基因治療是癌癥、病毒感染和心血管等疾病的極具潛力的治療手段。目前,陽離子聚合物作為非病毒載體成為人們的研究熱點,毒性較大和遞送效率不佳是目前急需解決的問題。為了解決聚陽離子載體存在的問題,本文在課題組前期研究的聚(2-(N,N-二甲基氨基)乙基甲基丙烯酸酯)(PDMAEMA)、聚己內(nèi)酯(PCL)以及聚乙二醇(PEG)形成的接枝或嵌段共聚物納米粒基礎(chǔ)上,研究了納米粒表面修飾層和疏水內(nèi)核的組成結(jié)構(gòu)對納米粒的基因遞送功能的影響。
　　研

2、究表明在PCL-g-PDMAEMANPs/DNA(NP-D)納米復(fù)合物表面通過靜電相互作用引入PEG接枝的聚谷氨酸(PGA-g-PEG,簡稱GP)形成三元復(fù)合物,能夠改善載體的生物相容性,但PEG修飾會引起轉(zhuǎn)染效率降低。本文中,我們合成了一系列具有不同主鏈和側(cè)鏈分子量的GP,考察三元復(fù)合物納米粒的粒徑,zeta電位以及DNA阻滯能力等物化特性,探究PGA以及接枝的PEG分子量對細(xì)胞毒性、胞內(nèi)攝取、體外基因轉(zhuǎn)染的影響。經(jīng)過本章實驗,我們優(yōu)

3、化出的NP-D-GP結(jié)構(gòu)是:PEG接枝率為7、分子量為46000的GP,電荷比為10/1/5為的NP-D-GP。
　　表面PEG修飾會降低載體細(xì)胞內(nèi)吞和溶酶體逃逸能力。透明質(zhì)酸(HA)具有受體介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞特異性內(nèi)吞以及細(xì)胞內(nèi)外透明質(zhì)酸酶(Hyal-1)響應(yīng)性降解脫殼的特點,有利于克服PEG修飾窘境,提高細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率。我們合成了PEG化HA(HA-g-PEG,HP),對粒徑、zeta電位、凝膠電泳、體外細(xì)胞胞吞及轉(zhuǎn)染、細(xì)胞相容性以及

4、體內(nèi)遞送進(jìn)行評價,探討不同聚陰離子和PEG接枝率對基因遞送功能的影響。HP能很好屏蔽二元復(fù)合物NP-D表面的正電荷,有效提高復(fù)合物NP-D-HP的細(xì)胞相容性,實現(xiàn)胞內(nèi)脫殼去PEG,因而有效提高了基因轉(zhuǎn)染效率。
　　為了進(jìn)一步探究疏水段結(jié)構(gòu)對DNA的負(fù)載、細(xì)胞內(nèi)吞和基因轉(zhuǎn)染效率的影響,本文合成了具有不同分子量的PCL和環(huán)醚側(cè)基單元改性的PCL為疏水嵌段聚陽離子,PEG-PCL-PDMAEMA(PEC),PEG-P(CL-co-TOU