生物可降解兩親性聚合物膠束的組裝及其作為藥物載體的研究.pdf

1、由于化療藥物能有效的抑制各種類型腫瘤細(xì)胞的生長，因此目前化療仍然是臨床癌癥治療的主要手段。然而化療藥物無法主動(dòng)富集于對腫瘤部位，降低了其治療效果，并對正常組織產(chǎn)生較大的毒副作用，因此各種基于刺激響應(yīng)型聚合物的納米智能藥物載體引起了人們的廣泛關(guān)注。納米智能藥物載體不僅可以增加了抗癌藥物的水溶性，并有效的延長了體內(nèi)停留時(shí)間，同時(shí)還可通過腫瘤組織的高通透性和滯留效應(yīng)（EPR effect）被動(dòng)靶向運(yùn)輸或主動(dòng)靶向運(yùn)輸并富集于腫瘤部位，并可通過對

2、腫瘤細(xì)胞特定刺激響應(yīng)，從而實(shí)現(xiàn)藥物的胞內(nèi)釋放，提高了藥物的治療效果，減少藥物的毒副作用。
　　本課題利用在腫瘤細(xì)胞內(nèi)高度表達(dá)的組織蛋白酶 B作為刺激源，選用在血漿內(nèi)較為穩(wěn)定且能被組織蛋白酶B特異性識別并降解的二肽鏈段纈氨酸-瓜氨酸（Val-Cit，VC）為連接鏈段，采用多步反應(yīng)合成了可酶降解的兩親性聚合物，利用動(dòng)態(tài)光散射（DLS）和透射電子顯微鏡（TEM）對其尺寸及形貌進(jìn)行表征。模擬血漿環(huán)境，以 pH7.4的磷酸鹽緩沖液（PBS）

3、為媒介，研究了聚合物膠束的穩(wěn)定性。利用DLS觀察聚合物膠束酶作用下粒徑的變化來評價(jià)膠束的降解行為。隨后模擬溶酶體環(huán)境研究了載藥膠束的體外釋藥行為。最后利用MTT試驗(yàn)評價(jià)了聚合物膠束的細(xì)胞毒性。
　　本論文主要研究結(jié)果為：（1）利用二肽鏈段Val-Cit作為連接劑，對氨基苯基碳酸酯（PABC）為間隔劑，合成了一種兩親性嵌段共聚物硬脂酸-纈氨酸-瓜氨酸-對氨基苯基碳酸酯-聚乙二醇甲醚（C18-VC-PABC-mPEG），在水環(huán)境下可自

4、組裝形成粒徑分布均一的球形膠束，平均粒徑約179 nm，隨后該膠束被用來包裹抗癌藥物阿霉素（DOX）。聚合物膠束的PBS分散液在10天內(nèi)粒徑未出現(xiàn)明顯變化，證明了該膠束在血漿條件可實(shí)現(xiàn)長效循環(huán)。在通過模擬溶酶體條件研究了 C18-VC-PABC-mPEG聚合物膠束的酶降解行為及其載藥膠束的釋藥行為，發(fā)現(xiàn)聚合物膠束在第7 d時(shí)，平均粒徑由179 nm增大到約280 nm，且粒徑隨著時(shí)間的延長進(jìn)一步增加，證明了C18-VC-PABC-mPE

5、G膠束的解體；同時(shí)，添加組織蛋白酶B（CB）的載藥膠束的釋藥量及釋藥速率均高于未添加CB的載藥膠束。此外，利用人類胰腺癌細(xì)胞株（BxPC-3）對聚合物載藥膠束、空白膠束和游離DOX進(jìn)行細(xì)胞毒性試驗(yàn)，結(jié)果表明 C18-VC-PABC-mPEG膠束幾乎沒有細(xì)胞毒性，且載藥膠束的毒性明顯低于游離DOX。（2）由于間隔劑PABC的存在使C18-VC-PABC-mPEG兩親型聚合物的合成過程過于繁瑣，造成其較低的產(chǎn)率，同時(shí)作為藥物載體CB識別VC

6、使聚合物發(fā)生解體即可實(shí)現(xiàn)藥物的釋放，因此采用多步反應(yīng)合成了另一種結(jié)構(gòu)更為簡單的可降解兩親性聚合物硬脂酸-纈氨酸-瓜氨酸-聚乙二醇甲醚（C18-VC-mPEG），在水性環(huán)境下也自組裝形成粒徑約為197 nm的橢球形膠束。在模擬血漿環(huán)境下，C18-VC-mPEG膠束在7天內(nèi)粒徑未發(fā)生明顯的變化，表現(xiàn)出較好的穩(wěn)定性。通過模擬溶酶體酸性環(huán)境，發(fā)現(xiàn)在CB催化作用下，C18-VC-mPEG膠束在第4 d時(shí)平均粒徑由197 nm增大到約300 nm，