不同分子量馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯的制備及降血脂機理的初步研究.pdf

1、馬尾藻(Sargassum pallidum)是海洋褐藻中的藻類,其屬于褐藻門(Phaeophyta),墨角藻目(Fucales)、馬尾藻科(Sagassaceae)、馬尾藻屬(Sargassum)。在海藻多糖中有由多糖結(jié)合硫酸基而形成具有活性的巖藻聚糖硫酸酯(Fuciodan),其具有較明顯的抗腫瘤、抗病毒、抗凝血及提高機體免疫力等功能。但是由于其分子量過大,因此導致它的溶解性和生物吸收較差,限制了其在各個領域中的研究和應用。

2、　　本論文采用稀酸降解馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯,并研究其分離純化及理化性質(zhì),探討了不同組分馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯對高脂血癥小鼠機體脂質(zhì)的調(diào)節(jié)作用,同時初步研究了其降血脂的機理,以期為馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯的活性評價的建立提供理論依據(jù),為馬尾藻的開發(fā)提供參考。主要研究內(nèi)容如下:
　　(1)通過DEAE-52纖維素離子交換柱層析法對已制得的馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯粗品進行純化,分離出兩個含硫酸基組分(F1、F2),分別經(jīng)過酸降解和Sephacry

3、凝膠柱進一步分離純化,得到四個組分(MMWF1、MMWF2、LMWF1和LMWF2)。檢測各組分的化學組成,MMWF1、MMWF2、LMWF1和LMWF2的總糖含量分別為57.89％、55.45%、56.18%和52.64%;硫酸基含量分別為18.89%25.11%、14.42%和19.76%;巖藻糖含量分別為15.77%、17.91%、13.44%和16.49%;糖醛酸含量分別為6.34%、6.31%、6.28%和6.17%。MMWF

4、1、MMWF2、LMWF1和LMWF2均為單一峰,平均分子量分別為16.32K、15.49K、7.65K和7.21K。通過GC法測定馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯各組分的單糖組成,MMWF1、MMWF2、LMWF1和LMWF2均是由鼠李糖、巖藻糖、木糖、甘露糖、葡糖糖和半乳糖構(gòu)成,但各組分的單糖含量各不相同。紅外光譜測定MMWF1、MMWF2、LMWF1和LMWF2的結(jié)構(gòu),結(jié)果表明四個組分均含有多糖的特征吸收峰和硫酸基的吸收峰。
　　(2)

5、通過高脂飼料喂養(yǎng)誘導小鼠建立高脂血癥模型,利用不同分子量馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯對小鼠的作用,探索其降血脂效果。結(jié)果表明,灌胃四種分子量巖藻聚糖硫酸酯對實驗小鼠的體重增長無顯著影響,但高劑量的四種巖藻聚糖硫酸酯能夠明顯表明可降低小鼠的肝臟指數(shù)(p﹤0.05),預防脂肪肝的產(chǎn)生。四種巖藻聚糖硫酸酯具有顯著降低高脂血模型小鼠血清和肝臟TG、TC、LDL-C含量(p﹤0.05)的作用,提高 HDL-C含量(p﹤0.05),對動脈粥樣硬化指數(shù)(AI

6、)也有明顯降低效果,具有預防動脈粥樣硬化的生成(p﹤0.05)的作用。實驗證明高劑量組作用最顯著,劑量依賴性較明顯。
　　(3)比較研究了四種馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯對高脂血癥模型小鼠體內(nèi)抗氧化酶活力的影響。結(jié)果表明,給予四種馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯全部可以有效提高小鼠的抗氧化能力,表現(xiàn)為血清和肝臟中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)活性提高,血清和肝臟中丙二醛(MDA)含量降低。其中高劑量

7、組和部分中低劑量組都達到顯著水平(p﹤0.05或p﹤0.01)。表明四種馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯能夠提高脂質(zhì)代謝紊亂小鼠機體的抗氧化能力,恢復機體內(nèi)的氧化系統(tǒng)平衡,降低脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)生,保持機體內(nèi)的脂質(zhì)代謝相關(guān)酶的活力,改善并恢復脂質(zhì)的正常代謝。
　　(4)利用4種馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯對高脂血癥小鼠體內(nèi)脂質(zhì)代謝相關(guān)酶和膽固醇合成關(guān)鍵酶的效果,比較各自影響的大小。結(jié)果表明,4種多糖可顯著提高高脂血癥小鼠血清卵磷脂膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(LCA