巖藻多糖硫酸酯的抗腫瘤活性篩選和初步機(jī)理研究.pdf

1、巖藻多糖硫酸酯是一種硫酸化多糖，存在于多種可食用褐藻中，例如裙帶菜、墨角藻、羊棲菜和昆布等。巖藻多糖硫酸酯具有多種生物活性，例如抗腫瘤[1-4]、抗氧化[5]、抗炎等[6]。最近研究表明巖藻多糖硫酸酯可以在人類淋巴癌細(xì)胞[4]、乳腺癌細(xì)胞[7，8]、結(jié)腸癌細(xì)胞[9]以及肺癌細(xì)胞[10]中誘導(dǎo)凋亡的發(fā)生，從而發(fā)揮抗腫瘤活性。
　　 細(xì)胞程序性死亡包括凋亡性程序性細(xì)胞死亡和自噬性程序性細(xì)胞死亡。細(xì)胞凋亡，也稱Ⅰ型程序性細(xì)胞死亡，以細(xì)

2、胞皺縮、發(fā)泡，細(xì)胞核染色質(zhì)濃縮為特點[11,12]。自噬也稱為Ⅱ型程序性細(xì)胞死亡，在這一過程中，細(xì)胞漿中的大分子物質(zhì)和細(xì)胞器被包裹形成自噬體，隨后與溶酶體融合并對自噬體內(nèi)容物成分進(jìn)行降解[13,14]。以前的研究表明，在機(jī)體受到外界環(huán)境刺激時[15]或疾病狀態(tài)下[16]，自噬對機(jī)體起到保護(hù)作用。然而，在腫瘤治療中，自噬究竟是起保護(hù)作用還是促進(jìn)細(xì)胞的死亡仍然需要進(jìn)一步確定。此外，在腫瘤細(xì)胞中，對于自噬與凋亡之間關(guān)系的研究仍不透徹，需要我們

3、重點關(guān)注。3-Methyladenine(3-MA)是自噬性程序性細(xì)胞死亡通路的抑制劑。研究表明，3-MA可以促進(jìn)化學(xué)治療劑所誘導(dǎo)的凋亡。例如，在結(jié)腸癌細(xì)胞中，3-MA提高了5-氟尿嘧啶所誘導(dǎo)的凋亡[17]。在人宮頸癌細(xì)胞Hela細(xì)胞中，3-MA同樣可以上調(diào)冬凌草甲素所誘導(dǎo)的凋亡[18]。
　　 在本次研究中，我們探索了在人宮頸癌細(xì)胞Hela細(xì)胞中，巖藻多糖硫酸酯的抗腫瘤活性。結(jié)果表明:巖藻多糖硫酸酯可以通過誘導(dǎo)Hela細(xì)胞發(fā)生

4、凋亡以及自噬性程序性細(xì)胞死亡，來抑制細(xì)胞的生長。凋亡的發(fā)生伴隨著線粒體膜電位的下降、抗凋亡蛋白Bc(l)-2表達(dá)的下調(diào)以及促凋亡蛋白Bax表達(dá)的上調(diào)。形態(tài)學(xué)研究結(jié)果表明，巖藻多糖硫酸酯作用于Hela細(xì)胞還可以導(dǎo)致自噬體的形成，這是自噬的一個典型的特征。此外，我們觀察到巖藻多糖硫酸酯誘導(dǎo)Hela細(xì)胞微管相關(guān)蛋白Ⅰ的輕鏈3(LC3)-Ⅱ的表達(dá)量提高，這在一定程度上反映了細(xì)胞的自噬活性的提高。通過自噬抑制劑3-MA的使用探討自噬與凋亡之間的關(guān)