烯啶蟲(chóng)胺上轉(zhuǎn)換熒光標(biāo)記免疫檢測(cè)技術(shù)的研究.pdf

1、本論文對(duì)烯啶蟲(chóng)胺上轉(zhuǎn)換免疫分析方法進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。
　　利用水熱法合成了疏水性、粒徑均勻的上轉(zhuǎn)換材料NaYF4:Er3+，Yb3+(OA-UCNPs)，利用聚丙烯酸(PAA)通過(guò)配體交換途徑在高溫下對(duì)OA-UCNPs進(jìn)行了表面羧基修飾與活化，形成了水溶性的PAA-UCNPs。
　　將由Protein A—Sepharose4B純化得到的烯啶蟲(chóng)胺多克隆抗體偶聯(lián)到PAA-UCNPs的表面形成信號(hào)探針;將烯啶蟲(chóng)胺的包被抗原偶聯(lián)到

2、聚苯乙烯微球的表面形成感應(yīng)探針，并對(duì)多克隆抗體與包被抗原的添加量分別進(jìn)行了優(yōu)化，每5 mgPAA-UCNPs中多克隆抗體的添加量為0.5 mg，每2.5 mg聚苯乙烯微球中包被抗原的添加量為0.2 mg。經(jīng)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化確定了感應(yīng)探針的添加量為100μL，孵育反應(yīng)時(shí)間為50 min，在此基礎(chǔ)上建立了烯啶蟲(chóng)胺的上轉(zhuǎn)換免疫分析方法，定量限為1 ng/mL，線性范圍為1 ng/mL～10000 ng/mL。建立的上轉(zhuǎn)換免疫分析方法具有很好的特異性，

3、與其他3種煙堿類殺蟲(chóng)劑及7種其他類型殺蟲(chóng)劑的交叉反應(yīng)率很小。選取了4種蔬菜樣品（番茄、卷心菜、黃瓜、大白菜）、4種果汁樣品（番茄汁、橙汁、蘋(píng)果汁、葡萄汁）與4種水樣品（純凈水、自來(lái)水、河水、湖水），對(duì)樣品前處理?xiàng)l件進(jìn)行優(yōu)化，消除了樣品基質(zhì)影響，得到一套簡(jiǎn)單可行的樣品處理方法，蔬菜樣品的添加回收率在70％～100％之間，變異系數(shù)為1.91％～9.40％;果汁樣品的添加回收率在90％～110％之間，變異系數(shù)為1.32％～8.39％;水樣品的